機能性RNA解析に基づく治療抵抗性小児白血病に対する革新的治療標的の探索

基于功能RNA分析寻找难治性儿童白血病的创新治疗靶点

• 批准号: 21K15898
• 负责人: 岡田 玲緒奈
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15898/
• 关键词: マイクロRNA; 小児急性リンパ性白血病; がん遺伝子; 再発・難治ALL; 機能性RNA; スーパーエンハンサー; マスター遺伝子; ドラッグリポジション

小児急性リンパ性白血病(ALL)は小児悪性疾患のうち約25%を占める最も頻度の高いものである。治療法の改善によって、予後は劇的に改善しているものの、化 学療法に強い抵抗性を示す「再発・難治症例」がALL症例のうち10-20%を占め、これらの治療には現在も難渋し、救命困難である。小児ALLは、既知のリスク因子 を用いて、3つのリスク群「標準リスク」「中間リスク」「高リスク」に分類され治療が選択されるが、比較的治療強度が低くてもよいとされる「標準リスク」 「中間リスク」の患者の中にも再発するケースが散見される。一般的に、再発症例では、通常の化学療法により再度寛解を得て造血幹細胞移植を目指すが、そも そも再度の寛解が得られないケースもしばしば経験される。ALL細胞が、既存の治療に対して、治療抵抗性を獲得する分子機序を解明する事は、本疾患の重要な 課題である。申請者がこれまで行ってきた機能性RNA、特にマイクロRNAの遺伝子発現調節および、転写調節領域: スーパーエンハンサーによる遺伝子発現調節の 両者を組み合わせた解析を行うことにより、治療抵抗性に関わるマスター遺伝子の発見を目指している。 治療抵抗性を獲得したALLの臨床検体と、同じ患者での初発時(治療感受性あり)検体のマイクロRNAシーケンス結果を解析し、治療抵抗性のあるも ので発現が有意に低下しているマイクロRNAを見出した。これにより18の候補マイクロRNAを抽出でき、さらにそのうち5種は初発時の発現がある程度あり、解析 に適していると判断した。まずはこれらのマイクロRNAの強制発現ががん抑制性を実際に細胞実験で示せるか(すなわち、これらのマイクロRNAの発現低下が治療 抵抗性に関与しているか)を示すため、ALL細胞株(既存のものと、申請者が樹立したもの)にマイクロRNAの核酸導入を行うための各種方策を試行した。

小儿急性淋巴细胞白血病（ALL）是最常见的儿童恶性疾病，约占25%。尽管随着治疗方法的改进，预后已显着改善，但 10-20% 的 ALL 病例是对化疗高度耐药的“复发或难治性病例”，而目前尚无可用的治疗方法。拯救生命。根据已知的危险因素，将儿童 ALL 分为“标准风险”、“中等风险”和“高风险”三个风险组，并选择治疗方法，但据说治疗强度相对较低。即使在“标准风险”和“中等风险”患者中，也有偶尔出现复发的情况。一般来说，复发的情况下，目的是通过常规化疗再次达到缓解，然后进行造血干细胞移植，但也有很多情况下并没有达到缓解。阐明 ALL 细胞对现有治疗产生耐药性的分子机制是该疾病的一个重要挑战。通过结合申请人迄今为止进行的功能性RNA（特别是微小RNA）的基因表达调控和转录调控区（超级增强子）对基因表达的调控进行分析，我们将能够鉴定参与治疗的主基因旨在发现。 我们分析了获得治疗耐药性的 ALL 临床标本和同一患者初次发病（对治疗敏感）时的标本的 microRNA 测序结果，发现在治疗耐药性患者中表达显着降低的 microRNA。出去。结果，我们能够提取 18 个候选 microRNA，我们确定其中 5 个在初次发病时有一定程度的表达，因此适合分析。首先，为了证明这些microRNA的强制表达是否真的能够在细胞实验中表现出肿瘤抑制特性（即这些microRNA的表达减少是否与治疗耐药有关），我们使用了ALL细胞系（现有的），我们尝试了各种策略来引入将microRNA核酸转化为microRNA(包括申请人自己建立的和申请人自己建立的)。