機能性RNA解析に基づく治療抵抗性小児白血病に対する革新的治療標的の探索

基于功能RNA分析寻找难治性儿童白血病的创新治疗靶点

• 批准号: 21K15898
• 负责人: 岡田 玲緒奈
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15898/
• 关键词: マイクロRNA; 小児急性リンパ性白血病; がん遺伝子; 再発・難治ALL; 機能性RNA; スーパーエンハンサー; マスター遺伝子; ドラッグリポジション

小児急性リンパ性白血病(ALL)は小児悪性疾患のうち約25%を占める最も頻度の高いものである。治療法の改善によって、予後は劇的に改善しているものの、化 学療法に強い抵抗性を示す「再発・難治症例」がALL症例のうち10-20%を占め、これらの治療には現在も難渋し、救命困難である。小児ALLは、既知のリスク因子 を用いて、3つのリスク群「標準リスク」「中間リスク」「高リスク」に分類され治療が選択されるが、比較的治療強度が低くてもよいとされる「標準リスク」 「中間リスク」の患者の中にも再発するケースが散見される。一般的に、再発症例では、通常の化学療法により再度寛解を得て造血幹細胞移植を目指すが、そも そも再度の寛解が得られないケースもしばしば経験される。ALL細胞が、既存の治療に対して、治療抵抗性を獲得する分子機序を解明する事は、本疾患の重要な 課題である。申請者がこれまで行ってきた機能性RNA、特にマイクロRNAの遺伝子発現調節および、転写調節領域: スーパーエンハンサーによる遺伝子発現調節の 両者を組み合わせた解析を行うことにより、治療抵抗性に関わるマスター遺伝子の発見を目指している。 治療抵抗性を獲得したALLの臨床検体と、同じ患者での初発時(治療感受性あり)検体のマイクロRNAシーケンス結果を解析し、治療抵抗性のあるも ので発現が有意に低下しているマイクロRNAを見出した。これにより18の候補マイクロRNAを抽出でき、さらにそのうち5種は初発時の発現がある程度あり、解析 に適していると判断した。まずはこれらのマイクロRNAの強制発現ががん抑制性を実際に細胞実験で示せるか(すなわち、これらのマイクロRNAの発現低下が治療 抵抗性に関与しているか)を示すため、ALL細胞株(既存のものと、申請者が樹立したもの)にマイクロRNAの核酸導入を行うための各種方策を試行した。

小儿急性淋巴细胞性白血病（全部）是最常见的，约占儿童恶性疾病的25％。尽管由于治疗方法的改善，预后有了明显的改善，但在所有病例中，有10-20％的病例具有“重复且棘手的病例”，表现出对化学疗法的强烈抗药性，这些治疗仍然很困难且节省生命。小儿所有人都被归类为三个风险组：“标准风险”，“中间风险”和“高风险”，使用已知风险因素，并且选择了治疗，但是在许多情况下，患者恢复后，患有“标准风险”或“中间风险”的患者据说具有相对较低的治疗强度。通常，在复发病例中，正常的化疗旨在缓解和造血干细胞移植，但这通常是在无法缓解的情况下经历的。阐明所有细胞对现有治疗的耐药性的分子机制是该疾病的重要问题。通过执行结合了功能性RNA的基因表达调节，尤其是microRNA，以及通过转录调节区域调节基因表达调节的分析：超级体现者，申请人旨在发现涉及治疗耐药性的主基因。分析了同一患者初次发病率（具有治疗敏感性）时获得耐药性和标本的所有临床标本的microRNA测序结果，并发现对治疗具有抗药性的microRNA显着降低了表达。这允许提取18个候选microRNA，并且还确定其中5个适合分析，在初始切口时表达了一些表达。首先，为了证明在细胞实验中是否可以证明这些microRNA的强迫表达是否可以被证明是癌症的抑制作用（即，这些microRNA的表达降低是否参与了治疗耐药性），试图尝试将microRNA转移到所有细胞系中（以前的细胞系（并由申请人建立）。