Sulforaphane inhibits hepatic cncer growth via the Nrf2 signaling cascade.

萝卜硫素通过 Nrf2 信号级联抑制肝癌生长。

• 批准号: 18K15793
• 负责人: 佐藤 慎哉
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-12-19 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K15793/
• 关键词: スルフォラファン; 肝癌; 抗腫瘍効果; ソラフェニブ; sulforaphane; Nrf2; 血管新生; スルフォラファン; 肝癌; 抗腫瘍効果; ソラフェニブ; sulforaphane; Nrf2; 血管新生

in vivo実験としてヒト肝癌細胞株（HepG2、Huh-7）をnude mouse（BALB/cSlc-nu/nu、6wks）の左右両背部の皮下に3×106個ずつ接種したXenograftモデルを作成し、Sulforaphane(5μmol/day/mouse、以下SFNとする)の経口投与中における腫瘍体積変化を経時的に評価すると同時に、皮下から採取した腫瘍を組織学的に検討した。両肝癌細胞にて細胞株接種後5週目の腫瘍体積が対照群に比べてSulforaphane投与群では半減していた。腫瘍内のNrf2の標的遺伝子（HO-1、MRP2、NQO1）のmRNA発現をrealtime PCR法を用いて測定するとSFN投与群で上昇していた。細胞周期マーカーの検討からはSFN投与群ではCyclinD1、CDK2の発現が抑制されており、G1arrestが起こっている可能性が示唆された。また免疫組織学的な検討により、SFN投与群ではKi67陽性細胞数が対照群と比較して有意に減少しており、Cleaved Caspase3陽性細胞数が増加していたことから、腫瘍細胞の増殖抑制とアポトーシスの亢進が確認された。さらに腫瘍の増大には血管新生が大きな役割を果たしているので、血管新生の重要な蛋白であるCD34を免疫染色にて評価すると、いずれの細胞においてもコントロール群と比較しSFN投与群で陽性領域の減少を認めた。定量するとSFN投与群で有意に抑制していた。以上まとめると、in vivoにおいてSFN投与によりヒト肝癌細胞株の増殖は有意に抑制しており、アポトーシスの亢進も示唆された。さらに腫瘍内部の血管新生も抑制されていた。中断再開後は、メカニズムの解明のためin vitroの実験を進めていく予定である。

作为一个体内实验，创建了一个异种移植模型，其中在该模型中，在裸鼠的左右背侧接种了人肝癌细胞（HEPG2，HUH-7），在裸鼠（BALB/CSLC-NU/NU，6WKS）上均皮下接种，以及在口腔内降低了硫含量（5μmouse/nu）的肿瘤（5μmouse/day）的肿瘤体积变化（5μmmeouse/tumor）。随着时间的流逝，从组织学检查了从皮下收集的肿瘤。与对照组相比，在两个肝癌细胞中接种细胞系后5周的肿瘤体积在两个肝癌细胞中的肿瘤体积减半。当使用实时PCR测量NRF2（HO-1，MRP2，NQO1）的靶基因的mRNA表达时，它在SFN组中升高。细胞周期标记的检查表明，Cyclind1和Cdk2的表达在SFN组中受到抑制，这表明可能发生G1arrest。此外，免疫组织化学研究表明，与对照组相比，经SFN处理组中Ki67阳性细胞的数量显着降低，并且裂解的caspase3阳性细胞的数量增加，表明肿瘤细胞的生长抑制和细胞凋亡增加。此外，血管生成在肿瘤生长中起着重要作用，当通过免疫染色评估CD34是血管生成的重要蛋白时，与对照组相比，SFN组的两个细胞中的阳性区域均降低。定量地，该组在SFN给药组中受到显着抑制。为了总结上述内容，SFN给药在体内显着抑制了人肝癌细胞系的增殖，这表明凋亡得到了增强。此外，还抑制了肿瘤内的新血管化。悬架恢复后，我们计划进行体外实验以阐明机制。