自律神経を介した腸管制御性T細胞誘導能の解明と新規腸炎治療法の開発

阐明通过自主神经诱导肠道调节性T细胞的能力并开发肠道炎症的新治疗方法

• 批准号: 22KJ2715
• 负责人: 松原 佑太
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2715/
• 关键词: 炎症性腸疾患; 自律神経; 迷走神経; 抑制性T細胞

迷走神経が腸管抗原提示細胞のAChRに作用しTregを誘導することが判明したが、具体的に抗原提示細胞のどの集団に、どの様に働きかけているかは解明されておらず、本研究を通じ迷走神経を介したTreg誘導に関与する腸管抗原提示細胞分画の同定および機序を解明することを目的としている。C57BL/6マウスに対して横隔膜下のレベルで迷走神経切断術 (VGx)を行い7日間経過した後に、腹部切開のみを施行したsham手術群と比較し迷走神経による影響の検討を行った。その後大腸粘膜固有層の細胞を取り出し、フローサイトメトリーでの検討を行ったところ、炎症の抑制作用を示すTreg細胞数の減少、および炎症の促進作用を示すTh17細胞数の増加を確認した。その後より遺伝子レベルでの迷走神経切断の効果を検討するために、VGx群とsham手術群のAPC分画をCell sorterで単離し、CD3e、CD19、上皮を除いたCD45陽性細胞でsingle cell RNA-seq(scRNA-seq)を行った。迷走神経切断群の7921細胞、Sham手術群の6995細胞をさらなる解析にかけ、その結果、20のクラスターに細胞集団がそれぞれの遺伝子の特徴で分かれることが判明した。APC文革において、IL6遺伝子、IL12b遺伝子、IL23a遺伝子の発現が迷走神経切断により上昇をすることを確認し、迷走神経切断によりTreg減少のカウンターパートとしてAPCでIL-6、IL-12、IL-23分泌が増加することで、ナイーブCD4 T細胞のTh17への分化が促進されるという可能性が考えられた。

虽然已经发现迷走神经作用于肠道抗原呈递细胞的AChR诱导Tregs，但目前还不清楚它作用于哪一组抗原呈递细胞以及如何作用，而通过本研究的目的是确定肠抗原呈递细胞部分并阐明神经介导的 Treg 诱导的机制。对 C57BL/6 小鼠膈下水平进行迷走神经切断术 (VGx) 7 天后，我们将迷走神经的影响与仅进行腹部切口的假手术组进行了比较。然后取出大肠固有层细胞并使用流式细胞术进行检查，结果显示抑制炎症的 Treg 细胞数量减少，而促进炎症的 Th17 细胞数量增加。随后，为了在基因水平上进一步检查迷走神经切断术的影响，使用细胞分选仪分离来自VGx组和假手术组的APC组分，并进行单细胞RNA-seq（scRNA-seq）。对迷走神经切断术组的 7921 个细胞和假手术组的 6995 个细胞的进一步分析表明，细胞群根据其遗传特征分为 20 个簇。 APC文革中证实，迷走神经切断后IL6基因、IL12b基因、IL23a基因的表达增加，考虑了分泌增加可能促进幼稚CD4 T细胞的Th17分化的可能性。

项目成果

Insights in autonomic nervous system-mediated induction of gut regulatory T cells

自主神经系统介导的肠道调节性 T 细胞诱导的见解

• 发表时间: 2022
• 作者: Yuta Matsubara;Toshiaki Teratani;Yohei Mikami;Takanori Kanai
• 通讯作者: Takanori Kanai