オリゴペプチドによる高血圧予防のための新戦略提案

提出利用寡肽预防高血压的新策略

基本信息

批准号：
19J20948
负责人：
SHEN Weilin
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、オリゴペプチドを主体とした新規血圧調節メカニズムを提唱するものである。そこで、オリゴペプチドの体内動態の解明は極めて重要であり、本研究では、オリゴペプチドを高感度に検出するためのエレクトロスプレーイオン化質量分析（ESI-MS）法における検出特性を評価し、機能性オリゴペプチドAsp-Gly-Tyr-Met-Proの腸管吸収性を評価した。グリシンおよびサルコシンからなる5残基までのモデルペプチドを合成し、各種アミン誘導体化（TNBS, APDS, NDA, coumarin）反応を行った。ESI-MS分析において、対象ペプチドおよびその化学誘導体はすべて検出され、その検出性について分子表面積を指標として行ったところ、MS感度はイオン化対象分子の表面積（最大MS検出領域：250-300 square angstrom）に依存することを明らかにした。Asp-Gly-Tyr-Met-Proに対し、誘導体化法により更に高い検出感度を得られなかったため、そのままESI-MS分析に供した。Caco-2細胞膜透過試験において、当ペプチドは細胞間隙タイトジャンクションを介しそのままの形でCaco-2細胞膜を透過することを明らかにした。SD系ラット単回経口投与試験において、Asp-Gly-Tyr-Met-Proはそのままの形でラット循環血中に移行すること（Cmax: 2.78 ± 0.17 pmol/mL-plasma, tmax: 15 min, AUC0-60 min: 100.35 ± 23.40 pmol・min/mL-plasma, t1/2: 28 min）を明らかにした。また、ラット循環血中においてAsp-Tyr-Met-ProおよびMet-Proが検出され、一部のAsp-Gly-Tyr-Met-Proは吸収過程において代謝を受けたことを示された。

本研究提出了一种基于寡肽的新型血压调节机制。因此，阐明寡肽的药代动力学极为重要，在本研究中，我们评估了用于高灵敏度检测寡肽的电喷雾电离质谱（ESI-MS）的检测特性，以及寡肽的肠道吸收情况。对肽 Asp-Gly-Tyr-Met-Pro 进行了评估。合成了最多由甘氨酸和肌氨酸组成的五个残基组成的模型肽，并进行了各种胺衍生反应（TNBS、APDS、NDA、香豆素）。在ESI-MS分析中，检测所有目标肽及其化学衍生物，并使用分子表面积作为指标来确定MS灵敏度，由电离的目标分子的表面积（最大MS检测面积）决定。：250-300平方埃）据透露，这取决于由于衍生化方法无法获得Asp-Gly-Tyr-Met-Pro较高的检测灵敏度，因此直接进行ESI-MS分析。在 Caco-2 细胞膜渗透测试中，发现该肽通过细胞间紧密连接渗透 Caco-2 细胞膜。在对 SD 大鼠的单次口服给药研究中，发现 Asp-Gly-Tyr-Met-Pro 以其未改变的形式进入大鼠循环（Cmax：2.78 ± 0.17 pmol/mL-血浆，tmax：15 分钟，AUC0 -60分钟：100.35 ± 23.40 pmol·min/mL-血浆，t1/2：28 分钟）。此外，在大鼠循环血液中检测到Asp-Tyr-Met-Pro和Met-Pro，表明部分Asp-Gly-Tyr-Met-Pro在吸收过程中发生了代谢。