腎糸球体障害における凝固因子・内皮細胞・ポドサイトのクロストーク機構の解明

阐明肾小球疾病中凝血因子、内皮细胞和足细胞之间的串扰机制

• 批准号: 19H00968
• 负责人: 前田 真吾
• 金额: $ 28.37万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19H00968/
• 关键词: 慢性腎臓病; 蛋白尿; クロストーク; トランスレーショナルリサーチ; ポドサイト; 糸球体障害; 凝固因子; 腎臓病; 腎不全; 糸球体; プロテアーゼ

アドリアマイシンまたはLPSを投与する糸球体障害マウスモデルを作製し、野生型マウスとPAR-2欠損マウスで蛋白尿およびポドサイト障害を評価した。その結果、野生型マウスでは蛋白尿およびポドサイト障害が認められたのに対して、PAR-2欠損マウスではそれらの改善が認められた。さらに慢性糸球体障害モデルである糖尿病性腎症マウスモデルを作製し、野生型とPAR-2欠損マウスで比較した。その結果、慢性糸球体障害モデルにおいても野生型と比較してPAR-2欠損マウスで蛋白尿やポドサイト障害の改善が認められた。腎臓の免疫染色により、PAR-2はポドサイトに高発現していることを確認した。そのためポドサイトに発現するPAR-2が糸球体障害に重要である可能性がある。PAR-2を活性化するリガンドとして凝固因子VIIaおよびXaがあるが、これらの凝固因子活性を抑えるTFPIと呼ばれる内因性プロテアーゼインヒビターが存在する。上記糸球体障害マウスにおいて、血中および腎臓内のTFPIが顕著に低下していることがわかった。そのため、TFPIの低下により凝固因子活性が亢進し、PAR-2が刺激されることで糸球体障害が進行する可能性が示された。これを証明するためにポドサイト特異的PAR-2コンディショナルKOマウスおよび血管内皮特異的TFPIコンディショナルKOマウスを作製中である。Podocin-Creマウス、VE-cadherin-Creマウスは既に導入し繁殖が完了している。PAR-2-floxマウスは今年度作製が完了し、現在繁殖およびCreマウスと交配中である。TFPI-floxマウスは残念ながら現段階で作製することができず、現在別のゲノム編集技術を用いて作製を試みている。また、ヒトの腎臓遺伝子発現データベースを用いた解析により、蛋白尿を呈する患者でPAR-2発現が亢進していることを明らかにした。

我们通过给予阿霉素或 LPS 建立了肾小球损伤的小鼠模型，并评估了野生型和 PAR-2 缺陷小鼠的蛋白尿和足细胞损伤。结果，在野生型小鼠中观察到蛋白尿和足细胞损伤，而在 PAR-2 缺陷小鼠中这些情况得到改善。此外，我们创建了糖尿病肾病（一种慢性肾小球疾病模型）小鼠模型，并将其与野生型小鼠和 PAR-2 缺陷型小鼠进行比较。结果，在慢性肾小球损伤模型中，与野生型小鼠相比，PAR-2缺陷小鼠的蛋白尿和足细胞损伤得到改善。肾脏免疫染色证实 PAR-2 在足细胞中高表达。因此，足细胞中表达的 PAR-2 可能对于肾小球疾病很重要。凝血因子 VIIa 和 Xa 是激活 PAR-2 的配体，但有一种称为 TFPI 的内源性蛋白酶抑制剂可以抑制这些凝血因子的活性。发现上述肾小球病小鼠的血液和肾脏中的TFPI显着降低。因此，研究表明，TFPI 的减少会增加凝血因子的活性并刺激 PAR-2，导致肾小球损伤的进展。为了证明这一点，我们目前正在生成足细胞特异性PAR-2条件KO小鼠和血管内皮特异性TFPI条件KO小鼠。 Podocin-Cre小鼠和VE-cadherin-Cre小鼠已引进并已完成繁育。 PAR-2-flox 小鼠已于今年培育出来，目前正在与 Cre 小鼠进行繁殖和杂交。不幸的是，现阶段还不可能创建 TFPI-flox 小鼠，我们目前正在尝试使用另一种基因组编辑技术来创建它们。此外，使用人类肾脏基因表达数据库的分析显示，蛋白尿患者中PAR-2表达增加。

项目成果

Human epidermal growth factor receptor 2 is overexpressed in canine prostate carcinoma

• DOI: 10.33611/trs.2020-018
• 发表时间: 2021
• 期刊: Translational and Regulatory Sciences
• 作者: K. Sakai;Y. Shinohara;K. Kaji;T. Yonezawa;Y. Momoi;S. Maeda

細菌性尿路感染症における起炎菌の分類および抗菌薬治療に伴う薬剤耐性菌出現頻度の回顧的解析

细菌性尿路感染病原菌分类及抗生素治疗相关耐药菌发生率回顾性分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 宮澤昌嵩;茂木朋貴;前田真吾;米澤智洋
• 通讯作者: 米澤智洋

猫の多発性嚢胞腎における大規模疫学調査と新規遺伝子多型の探索

猫多囊肾大规模流行病学调查及新基因多态性寻找

• 发表时间: 2022
• 作者: 野々垣彩香;茂木朋貴;米澤智洋;桃井康行;前田 真吾
• 通讯作者: 前田 真吾

Protease-Activated Receptor-2 Is Associated With Adverse Outcomes in Canine Mammary Carcinoma

• DOI: 10.1177/0300985820963087
• 发表时间: 2021-01-01
• 期刊: VETERINARY PATHOLOGY
• 影响因子: 2.4
• 作者: Kaji, Kenjiro;Kaji, Noriyuki;Maeda, Shingo
• 通讯作者: Maeda, Shingo

膀胱がんと抗体療法 ～ 制御性T細胞を制御する ～

膀胱癌和抗体治疗 ~ 控制调节性 T 细胞 ~

• 发表时间: 2021
• 作者: Kenjiro Kaji;Yuuri Shinohara;Tomohiro Yonezawa;Yasuyuki Momoi;Shingo Maeda;前田真吾
• 通讯作者: 前田真吾