プラズマ活性溶液によるプリオン感染細胞除去機構の解明

使用等离子体激活溶液阐明朊病毒感染细胞去除机制

基本信息

批准号：
20K03919
负责人：
作道章一
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Okayama University of Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでの研究でプリオン感染細胞は酸化ストレス物質に高い感受性を示すことが報告されている。また、本研究課題において、2021年度（令和3年度）には、空気由来のプラズマで調整したプラズマ活性溶液のプリオン感染細胞に対する細胞死誘導効果について解析したところ、プリオン感染細胞(ScN2a)が非感染細胞(N2a)と比較してプラズマ活性溶液に高い感受性を示すことが明らかとなっている。一方で、空気以外の気体由来のプラズマで調整したプラズマ活性溶液を用いた場合についても、同様の感受性の近いがあるのかは分かっていなかった。2022年度（令和4年度）はそれらを明らかにすることに注力した。酸素(O2)、窒素(N2)、二酸化炭素(CO2)、アルゴン（Ar)由来のプラズマからプラズマ活性溶液を調整し、ScN2aとN2aを処理してLDH（乳酸脱水素酵素）放出アッセイで死細胞の割合を比較したところ、 N2 >CO2 >O2 >Ar >Airの順番でScN2aとN2aの死細胞の割合の差が大きかった。さらに、ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)を用いたモノおよびオリゴヌクレオソーム定量によるアポトーシス(Apoptosis)の解析を同様に行ったところ、N2 >O2 >CO2 >Air >Arの順番でアポトーシス量の差が大きかった。由来する気体によりプラズマ生成時に発生する活性種の種類や量が異なることが知られており、今回得られた結果は、由来する気体によりプラズマ活性溶液に含まれる活性種が異なることでApoptosisなどの細胞死を引き起こす効果に違いが見られたものと考えられた。

先前的研究报告称，感染朊病毒的细胞对氧化应激源高度敏感。此外，在2021年（令和3年），我们分析了用空气来源的血浆制备的血浆活性溶液对朊病毒感染细胞的细胞死亡诱导作用，发现朊病毒感染细胞（ScN2a）未被感染。已表明，与感染细胞 (N2a) 相比，它们对血浆激活溶液高度敏感。另一方面，尚不清楚当使用由来自空气以外的气体的等离子体制备的等离子体激活溶液时是否存在类似的灵敏度。在 2022 财年（令和 4 年），我们重点澄清了这些要点。从氧气 (O2)、氮气 (N2)、二氧化碳 (CO2) 和氩气 (Ar) 衍生的等离子体中制备血浆活性溶液，并用 ScN2a 和 N2a 处理它们，以在 LDH（乳酸脱氢酶）释放测定中检测死细胞。从ScN2a和N2a的比例来看，死亡细胞比例差异较大，顺序为N2>CO2>O2>Ar>Air。此外，当我们使用ELISA（酶联免疫吸附测定）定量单核小体和寡核小体来类似地分析细胞凋亡时，我们发现细胞凋亡量按N2>O2>CO2>空气>Ar的顺序存在很大差异。塔。众所周知，等离子体生成过程中产生的活性物种的类型和数量根据源气体的不同而不同，而这次获得的结果表明，等离子体活性溶液中包含的活性物种根据源气体的不同而不同，这可能会引起问题人们认为引起细胞死亡的效果存在差异。