フィラリアを媒介しない蚊作出に向けたタイ王国における犬糸状虫の生態疫学調査

泰王国犬心丝虫生态流行病学调查，以产生不传播心丝虫的蚊子

基本信息

批准号：
19KK0175
负责人：
福本晋也
金额：
$ 11.73万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-10-07 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19KK0175/
关键词：
犬糸状虫ヤブカベクター

项目摘要

本研究計画では対フィールドサンプルの解析により、フィラリアを媒介しない蚊の作出を目指し研究を行う。2021年度までの研究においてタイフィールドサンプルのネッタイシマカから遺伝学的手法を用いて、犬糸状虫を媒介する系統と媒介しない系統を分離する方法の確立に成功した。またこれらの系統をゲノムレベルで比較するため次世代シーケンサーを用いたGRAS-Di解析を行ったが、フィールド由来サンプルを用いたことによる遺伝的多様性のためにマスクされ、犬糸状虫感染性に対する表現型に対し有意な差異検出することはできなかった。そこでこの遺伝的バックグラウンドの多様性に起因するマスクの問題を解決するため、媒介系統・非媒介系統を兄妹交配することで、犬糸状虫媒介性・非媒介性ネッタイシマカ近交系の樹立を試みた。5-7世代の近郊化を行い、繁殖性と感染表現型の評価を行った。その結果、これらの近交系系統は正常な繁殖能力を維持していること、犬糸状虫に対する感染表現型を正しく遺伝していることが確認された。双方の表現型の蚊を交配し、F1・F2世代の感染表現型を個体レベルで解析後、個体毎にDNAを抽出、プールした。ある程度近交係数をたかめた媒介性・非媒介性のそれぞれの群についてGRAS-Di解析を行った。その結果前回の解析として有意な変異を持つゲノム領域が検出された。現在QTL-Seq解析も併せて行うことで責任ゲノム領域の推定を進めている。新型コロナウイルス感染症の影響により頓挫していたタイでの現地調査を再開することに成功した。現地協力研究者とともにタイ王国チェンマイ地方で約400検体のヤブカ幼虫を採集、DNAを抽出保存した。GRAS-DI・QTL-Seq解析の結果をもとにフィールド蚊のジェノタイピングを今後行う予定である。

在这个研究项目中，我们的目标是通过分析现场样本来培育不会传播心丝虫的蚊子。在 2021 财年进行的研究中，我们成功地建立了一种方法，利用泰国现场样本中埃及伊蚊的遗传方法，将传播心丝虫的菌株与不传播心丝虫的菌株分开。此外，使用下一代测序仪进行了GRAS-Di分析，以在基因组水平上比较这些菌株，但由于使用的是野外来源的样本，遗传多样性被掩盖，导致表型无法显着差异。检测到。因此，为了解决遗传背景多样性带来的掩模问题，我们尝试通过载体与非载体品系杂交，建立载体介导和非载体的埃及伊蚊近交系。细分第5代至第7代，评价其繁殖能力和感染表型。结果证实，这些自交系保持了正常的繁殖能力，并正确遗传了犬心丝虫的感染表型。在培育两种表型的蚊子并在个体水平上分析 F1 和 F2 代的感染表型后，提取并汇集每个个体的 DNA。对近交系数有一定增加的介导组和非介导组各组进行GRAS-Di分析。结果，在之前的分析中检测到了具有显着突变的基因组区域。我们目前正在通过进行 QTL-Seq 分析来估计负责的基因组区域。我们成功重启了因新型冠状病毒感染的影响而陷入停滞的泰国实地调查。我们与当地的合作研究人员一起，在泰国清迈地区采集了约 400 个伊蚊幼虫样本，提取并保存了它们的 DNA。我们计划根据GRAS-DI和QTL-Seq分析的结果对野外蚊子进行基因分型。

项目成果

期刊论文数量（35）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Generation of Transgenic Mosquitoes Harboring a Replication-Restricted Virus

携带复制限制病毒的转基因蚊子的产生

DOI：
10.3389/fitd.2022.850111
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Shinzawa Naoaki;Kashima Chisako;Aonuma Hiroka;Takahashi Kei;Shimojima Masayuki;Fukumoto Shinya;Saiki Erisha;Yamamoto Daisuke S.;Yoshida Shigeto;Matsuoka Hiroyuki;Kawaoka Yoshihiro;Kanuka Hirotaka
通讯作者：
Kanuka Hirotaka

ネッタイシマカにおける遺伝的性決定随伴したDirofilaria immitis感染抵抗性表現型

埃及伊蚊的恶丝虫感染抵抗表型与遗传性别决定相关

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
白水貴大;関信彰;曽賀晃;森下雄貴;纐纈摩美;福本晋也
通讯作者：
福本晋也

チェンマイ大学/プリンスオブソンクラー大学(タイ)

清迈大学/宋卡王子大学（泰国）

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Generation of Transgenic Mosquitoes Harboring a Replication-Restricted Virus

携带复制限制病毒的转基因蚊子的产生

DOI：
10.3389/fitd.2022.850111
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Shinzawa Naoaki;Kashima Chisako;Aonuma Hiroka;Takahashi Kei;Shimojima Masayuki;Fukumoto Shinya;Saiki Erisha;Yamamoto Daisuke S.;Yoshida Shigeto;Matsuoka Hiroyuki;Kawaoka Yoshihiro;Kanuka Hirotaka
通讯作者：
Kanuka Hirotaka

Dirofilaria immitis 高媒介および非媒介Aedes aegypti株の交雑後代における感染表現型解析

高度矢量化和非矢量化埃及伊蚊菌株杂交后代的感染表型分析