自己免疫疾患におけるMEFV遺伝子変異の病態修飾に関する研究

MEFV基因突变在自身免疫性疾病中的病理修饰研究

基本信息

批准号：
19K17888
负责人：
遠藤友志郎
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

CRISPER-Cas9を用いて遺伝設計を行い、全身性エリテマトーデス(SLE)のモデルマウスとして知られるMRL/lprマウスへのMEFV exon 2 E148Q hetero多型のKnock In(KI)の作製に成功、さらに同マウスの継代を重ねることでE148Q KIマウス(MEFV E148Q KI MRL/lpr mice)の作製に成功した。また、コントロールとしてpoint mutationを伴わない同部位のMEFV exon 2をKIさせたMRL/lprマウスも作製し、体重変動や生存率、蛋白尿や自己抗体価の推移といった臨床評価、腎臓や皮膚などの組織学的評価、フローサイトメトリーによるB細胞やT細胞、単球等の細胞発現の評価、培養実験によるインフラマソーム活性化の評価を実行した。腎炎の組織学的な重症度判定では、5匹ずつの比較で明らかな有意差はないものの、MEFV E148Q KI MRL/lpr miceで腎炎が軽減する傾向が見られたため、今後数を増やし、さらに検討を行う予定である。また、自己抗体価やメモリーBcellの割合も有意にMEFV E148Q KI MRL/lpr miceで低下しており、この点は腎炎の軽減との一貫性が見られる。また、マウスモデルと一致して、SLE患者検体を用いたMEFVの解析に関しては、MEFV多型が存在することで、SLEにおける腎炎の発症が抑制される結果であり、モデルマウスの結果と矛盾なく、MEFV多型はループス腎炎発症には保護的に働くことが示唆された。これらの結果は今後更なる解析を行った後に報告予定である。ただし、MEFV多型の存在による臨床像の違いにおけるその機序の解明のため更なる研究が必要である。

通过使用 CRISPER-Cas9 的基因工程，我们成功地在 MRL/lpr 小鼠中产生了 MEFV 外显子 2 E148Q 异质多态性的敲入 (KI)，该小鼠被称为系统性红斑狼疮 (SLE) 模型小鼠，并进一步我们通过反复传代培养了相同的小鼠，成功产生了E148Q KI小鼠（MEFV E148Q KI MRL/lpr小鼠）。此外，作为对照，我们制备了同一位点MEFV外显子2无点突变为KI的MRL/lpr小鼠，并进行了体重变化、存活率、蛋白尿变化和自身抗体滴度等临床评价，并进行了临床评价。我们进行了组织学评估，通过流式细胞术评估 B 细胞、T 细胞和单核细胞等细胞的表达，并通过培养实验评估炎症小体的激活。虽然每只比较五只小鼠时，肾炎的组织学严重程度评估没有明显的显着差异，但我们观察到 MEFV E148Q KI MRL/lpr 小鼠的肾炎有减轻的趋势，因此我们将增加小鼠的数量并进行进一步的研究我们计划这样做。此外，MEFV E148Q KI MRL/lpr 小鼠的自身抗体滴度和记忆 B 细胞比例显着降低，这与肾炎的减少一致。此外，与小鼠模型一致，使用 SLE 患者标本进行的 MEFV 分析表明，MEFV 多态性的存在抑制了 SLE 肾炎的发作，这与小鼠模型结果一致，表明 MEFV 多态性对肾炎的发展具有保护作用。狼疮性肾炎。这些结果将在进一步分析后报告。然而，需要进一步的研究来阐明由于 MEFV 多态性的存在而导致的临床表现差异背后的机制。

项目成果

期刊论文数量（20）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Systemic lupus erythematosus overlapping dermatomyositis owing to a heterozygous TREX1 Asp130Asn missense mutation

TREX1 Asp130Asn 杂合错义突变导致系统性红斑狼疮重叠皮肌炎

DOI：
10.1016/j.clim.2021.108732
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
8.6
作者：
Endo Yushiro;Koga Tomohiro;Otaki Hiroki;Furukawa Kaori;Kawakami Atsushi
通讯作者：
Kawakami Atsushi

Inhibition of calcium/calmodulin-dependent protein kinase IV in arthritis: dual effect on Th17 cell activation and osteoclastogenesis

关节炎中钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶 IV 的抑制：对 Th17 细胞活化和破骨细胞生成的双重作用

DOI：
10.1093/rheumatology/keac381
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Tomohiro Koga; Masataka Umeda; Nobuya Yoshida; Yushiro Endo; Atsushi Kawakami; George C Tsokos
通讯作者：
George C Tsokos

Autoinflammatory disease: clinical perspectives and therapeutic strategies

自身炎症性疾病：临床观点和治疗策略

DOI：
10.1186/s41232-022-00217-7
发表时间：
2022-12-02
期刊：
影响因子：
8.1
作者：
Kawakami Atsushi;Endo Yushiro;Koga Tomohiro;Yoshiura Koh;Migita Kiyoshi
通讯作者：
Migita Kiyoshi

Inhibition of calcium/calmodulin-dependent protein kinase IV in arthritis: dual effect on Th17 cell activation and osteoclastogenesis

关节炎中钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶 IV 的抑制：对 Th17 细胞活化和破骨细胞生成的双重作用

DOI：
10.1093/rheumatology/keac381
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Tomohiro Koga; Masataka Umeda; Nobuya Yoshida; Yushiro Endo; Atsushi Kawakami; George C Tsokos
通讯作者：
George C Tsokos

Abnormalities of T cells in systemic lupus erythematosus: new insights in pathogenesis and therapeutic strategies

系统性红斑狼疮 T 细胞异常：发病机制和治疗策略的新见解