The risk analysis of staphylococcal food poisoning associated with new type of enterotoxins

新型肠毒素葡萄球菌食物中毒风险分析

• 批准号: 19K19427
• 负责人: 梅田 薫
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Osaka Institute of Public Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K19427/
• 关键词: 黄色ブドウ球菌; 新型エンテロトキシン; ブドウ球菌食中毒; 全ゲノム解析; サンドイッチELISA; RPLA法; エンテロトキシン; 食中毒; 汚染調査; 遺伝子検出; 黄色ブドウ球菌; 新型エンテロトキシン; ブドウ球菌食中毒; 全ゲノム解析; サンドイッチELISA; RPLA法; エンテロトキシン; 食中毒; 汚染調査; 遺伝子検出

1.エンテロトキシン遺伝子クラスター２にコードされた新型SEsの食中毒起因性を明らかにした。サンドイッチELISA法を用いて、2014年に発生したブドウ球菌食中毒事例由来菌株の新型SEs産生性および食品残品中に含まれる新型SEs量を測定した。食中毒由来菌株はすべて、高い新型SEs産生性を示した。食品残品の1つである寿司からは、食中毒を引き起こすのに十分な新型SEs量が検出された。次世代シーケンサーを用いて分離株の全ゲノム解析を実施した結果、エンテロトキシン遺伝子クラスター２周辺の遺伝子構造はSequence Type 45に属する菌に特異的であることが分かった。２.工場で炊飯された米飯の細菌汚染および食中毒リスクを調査した結果，35℃での保存試験に伴って生菌数が経時的に著しく増加した．米飯への接種試験により，経時的な菌の増殖と米飯中のエンテロトキシン産生が確認された．また，今回の保存試験の条件下では，米飯に添加されたpH調整剤の明確な静菌作用は認められなかった．pH調整剤の有無に関わらず，期限内の米飯であっても取り扱いを誤れば，大規模な食中毒に発展する可能性があることが分かった．３．１.の研究においてエンテロトキシン産生を確認したサンドイッチELISA法は感度、特異性ともに高く、優れた方法である。一方、地方衛生研究所や保健所検査室で実施する食中毒検査においては、複雑な手技や測定機器を必要としない逆受身ラテックス凝集反応法（RPLA法）が一般的に用いられている。しかし現在、市販されているのは従来型Ａ型～Ｅ型エンテロトキシン検出RPLA法のみであり、新型エンテロトキシンの検査に対応したRPLA法は存在しない。新型エンテロトキシンを検出するRPLA法構築のため、市販のポリクローナル抗体およびラテックスパーティクルを用いた予備実験を行った。

1。我们已经揭示了由肠毒素基因群集编码的新SES引起的食物中毒。使用三明治ELISA方法，我们测量了2014年源自葡萄球菌食物中毒病例的新SES的产生，以及2014年的葡萄球菌食物中毒病例，以及食物残留物中包含的新SES的量。所有食物中毒衍生的菌株均显示出高生产新SES。寿司是食物残留物之一，发现了足够数量的新SES引起食物中毒。使用下一代测序仪对分离株进行了整个基因组分析，发现肠毒素基因基因群群2周围的基因结构是针对属于45型序列的细菌。2。我们研究了在工厂烹饪的水稻中的细菌污染和食物中毒的风险，并发现了在35555555555°C中的烹饪量大大增加了活细菌的数量。对水稻的接种测试证实了随着时间的流逝，细菌的生长和水稻中肠毒素的产生。此外，在此储存测试的条件下，未观察到在大米中添加的pH调节器的明显抑菌作用。已经发现，即使截止日期内的大米也可能会出现大规模的食物中毒，而不管是否有pH值调节器。 Sandwich ELISA方法证实了研究3.1中肠毒素的产生，是一种具有高灵敏度和特异性的出色方法。另一方面，在当地卫生研究实验室和公共卫生中心进行的食物中毒测试中，通常使用了不需要复杂技术或测量设备的反射乳胶凝集反应（RPLA）方法。但是，目前仅在商业上可以使用常规的A-E肠毒素检测RPLA方法，并且没有RPLA方法支持新肠毒素的测试。为了构建一种RPLA方法来检测新的肠毒素，使用市售的多克隆抗体和乳胶颗粒进行了初步实验。