GABAアンタゴニスト投与による抗不安作用の検証

GABA拮抗剂给药的抗焦虑作用的验证

• 批准号: 20K16614
• 负责人: 梶田 裕貴
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K16614/
• 关键词: GABA; 不安障害; キンドリング; ラット; 行動実験; 不安様行動; GAD65

3年目の前半では、初年度に行った組織学的解析、次年度に行った行動学的解析を再度新しいラットを用いて、追加検証を行った。組織化学染色ではペンチレンテトラゾール（ＰＴＺ）の隔日連続の腹腔内投与（キンドリング）10回の時点で、以前と同様にソマトスタチン陽性細胞で有意なＧＡＤ６５発現量の増加が確認され、これらラットで不安様行動の有意な減少が確認された。キンドリング20回の時点ではＧＡＤ６５発現は生理食塩水投与（コントロール）群と同レベルまでＧＡＤ６５発現は低下しており、これらのラットではコントロール群と同程度の不安関連行動を示した。後半ではこららの結果を踏まえて、母子分離ストレスにより作成した不安障害モデルラットにＰＴＺキンドリング処置により、不安様行動の低下を引き起こせるのかを試した。しかしながら、母子分離ストレスでは多くの先行研究で報告されているような不安様行動の増加を引き起こすことが出来なかった上（うつ様行動は増加した）、母子分離された仔間で行動異常の程度のバラつきが非常に大きかった。仔ラットを分離する時間帯や時期、方法などを様々に変えて試したが、同様の結果であった。当初予定していた不安障害をキンドリング刺激により治療するという実験は行う事が出来なかった。しかしながら、ＧＡＢＡアンタゴニストの短期投与によりＧＡＤ６５が増加し、不安様行動が減少するということまでは明らかにすることができた。これまでの先行報告ではＰＴＺキンドリングによる不安様行動やＧＡＤ６５発現の増減に関して、異なる報告が混在していたが、本研究によりＰＴＺキンドリングは投与期間によりその効果はダイナミックに変動することが分かった。また、この結果は電気痙攣療法のメカニズム解明の足掛かりになると考える。

第三年上半年，使用新大鼠进一步验证第一年进行的组织学分析和第二年进行的行为分析。组织化学染色证实，连续10天腹腔内给予（点燃）戊四氮（PTZ）后，生长抑素阳性细胞中的GAD65表达与之前一样显着增加，并且在这些大鼠中观察到显着的焦虑样症状。观察到行为减少。在第 20 次点燃时，GAD65 表达已降低至与施用盐水（对照组）组相同的水平，并且这些大鼠表现出与对照组相同程度的焦虑相关行为。下半年，基于这些结果，我们测试了PTZ点燃治疗是否可以减少因母婴分离应激而产生的焦虑症模型大鼠的焦虑样行为。然而，母婴分离应激并不能够像之前许多研究报道的那样导致焦虑样行为增加（抑郁样行为增加），而且分离后代之间行为异常程度的变异非常大。我们尝试了各种分离幼鼠的方法，包括一天中的时间、时期和方法，但结果都是一样的。不可能按照原计划进行使用点燃刺激治疗焦虑症的实验。然而，我们能够证明短期施用 GABA 拮抗剂会增加 GAD65 并减少焦虑样行为。之前的报告对 PTZ 引燃引起的焦虑样行为和 GAD65 表达增加/减少的报道不一，但这项研究表明 PTZ 引燃的效果根据给药时间段的不同而动态变化。我们还相信这些结果将为阐明电休克治疗的机制提供立足点。

项目成果

Dynamic changes in GAD65 expression in somatostatin-positive interneurons during the acquisition of generalized epileptic seizures

全身性癫痫发作过程中生长抑素阳性中间神经元 GAD65 表达的动态变化

• 发表时间: 2020
• 作者: 梶田 裕貴;福田 湧希;大柳 貴紀;川松 里穂;虫明 元
• 通讯作者: 虫明 元