新規腫瘍マーカーとしてのテロメラーゼ活性亢進白血球の高感度検出システム構築

端粒酶活性增加作为新肿瘤标志物的白细胞高灵敏检测系统的构建

• 批准号: 20K16394
• 负责人: 岡部 隆宏
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K16394/
• 关键词: バイオマーカー; テロメラーゼ亢進白血球; がん早期治療奏功予測; がん早期診断; 新規腫瘍マーカー; テロメラーゼ亢進型白血球; がん早期発見; 奏功予測マーカー; のテロメラーゼ活性亢進白血球; がんバイオマーカー; 早期治療奏功予測; 早期がん診断; 非侵襲的高速高感度測定

血液等の液性生体試料からバイオマーカーを測定するリキッドバイオプシーが注目され、腫瘍組織の侵襲的な採取の代わりに、早期がん診断や抗がん剤の薬効予測などの臨床応用への試みが数多く行われてきた。本研究は、末梢血白血球のテロメラーゼ活性を測定できるシステムを構築し、テロメラーゼ活性亢進型白血球が肺がん早期診断や治療奏功予測の新規バイオマーカーとして有用であるか検証することを目的とした。本研究の基盤技術であるテロメスキャンOBP-401は遺伝子改変型アデノウイルスであり、感染した細胞にテロメラーゼ活性依存的に緑色蛍光タンパク質（GFP）を発現させ蛍光標識する。進行性の非小細胞肺がんと診断され、免疫チェックポイント阻害剤（ICI）のPD-1/PD-L1阻害剤で治療を実施された55症例と標準化学治療を実施された29症例の患者から末梢血を採取した。末梢血1 mLから分離した白血球をOBP-401感染によってGFP標識し、フローサイトメーターを用いてGFP陽性白血球を測定した。検出された散乱光のパターンから、GFP陽性白血球はすべて単球であることを確認した。治療2コース後のRECISTによる治療効果判定が病勢安定もしくは病勢進行した症例を非奏功例、部分奏効をした症例を奏功例と定義し、全単球中におけるGFP陽性率を比較した。その結果、ICI治療群では奏功例（22症例）と非奏効例（33症例）の間で治療前のGFP陽性率に有意差が認められた。また、それぞれの治療群で治療前と治療1コース後のGFP陽性率の推移を観察した結果、治療奏功と相関した傾向は認められなかった。以上の結果より、ICI治療前における単球のテロメラーゼ活性が奏功予測のバイオマーカーとなる可能性が示された。

液体活检从血液等液体生物样本中测量生物标志物，正在引起人们的关注，并且正在尝试作为肿瘤组织侵入性采集的替代方案，用于早期癌症诊断和预测抗癌药物的疗效等临床应用。已经做过很多次了。本研究的目的是构建一个可以测量外周血白细胞端粒酶活性的系统，并验证端粒酶活性增加的白细胞是否可作为肺癌早期诊断和治疗成功预测的新生物标志物。本研究的基础技术Telomescan OBP-401是一种转基因腺病毒，通过以端粒酶活性依赖性方式表达绿色荧光蛋白（GFP）来荧光标记感染细胞。收集了 55 名接受免疫检查点抑制剂 (ICIs) PD-1/PD-L1 抑制剂治疗的晚期非小细胞肺癌患者和 29 名接受标准化疗的患者的外周血。从 1 mL 外周血中分离出白细胞，通过 OBP-401 感染进行 GFP 标记，并使用流式细胞仪测量 GFP 阳性白细胞。从检测到的散射光图案可以确认，所有GFP阳性白细胞都是单核细胞。 2个疗程后经RECIST判定疾病稳定或进展的患者定义为无反应者，部分反应者定义为反应者，比较所有单核细胞的GFP阳性率。结果，在ICI治疗组中，治疗前有反应者（22例）和无反应者（33例）之间的GFP阳性率存在显着差异。此外，观察各治疗组1个疗程治疗前后GFP阳性率的变化，未观察到与治疗成功相关的趋势。这些结果表明 ICI 治疗前的单核细胞端粒酶活性可以作为预测反应的生物标志物。