Novel roles of seminolipid in the mouse testis

精磷脂在小鼠睾丸中的新作用

• 批准号: 21H02379
• 负责人: 高島 誠司
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02379/
• 关键词: 精子幹細胞ニッシェ; 血液精巣関門; 細胞間架橋; セミノリピド; 精子形成不全; 細胞極性; 減数分裂; 合胞体; 密着結合; 精子形成; 男性不妊; セミノリピッド; 精子幹細胞ニッシェ; 血液精巣関門; 細胞間架橋; セミノリピド; 精子形成不全; 細胞極性; 減数分裂; 合胞体; 密着結合; 精子形成; 男性不妊; セミノリピッド

本年度は２つの課題に対し以下に記すアプローチを行った。①雄性生殖細胞合胞体形成におけるセミノリピドの役割解明セミノリピド欠損精巣で出現する多核巨細胞は生殖細胞合胞体の形成異常によるものと推察される。初年度においてこの現象が生殖細胞分化のどの段階で起こるかを検証した結果、精母細胞のZygotene-mid Pachytene期にこれが出現することを突き止めた。本年度は細胞間架橋がどのステージで変容をきたすかを解析した。細胞間架橋の局在を蛍光免疫染色により解析したところ、セミノリピド欠損マウスでは初期精母細胞ですでに多核化を始めておりこの時細胞間架橋構成分子TEX14の局在が変容し架橋とは異なる位置の細胞表面に局在していることを見出した。このことはセミノリピドが細胞間架橋構成分子の局在制御に加担する可能性を示唆している。②血液精巣関門制御におけるセミノリピドの役割解明本年度は、電子顕微鏡観察による血液精巣関門の観察を行なった。結果、セミノリピド欠損精巣でも機能的な密着結合の存在を示す『発達したアクチン繊維に裏打ちされた細胞膜のキッシング構造』が確認された。このことは、セミノリピド非存在下でも密着結合を構築することができることを示している。そこで次に、密着結合の連続性の有無をホールマウント免疫染色で観察したところ、セミノリピド欠損精巣でも連続した密着結合帯の形成が確認された。しかしこの時、結合装置を裏打ちするアクチン繊維の束にほつれのようなものが見られた。

今年，我们对这两个问题采取了以下方法。 1。阐明塞诺脂蛋白在雄性生殖细胞合成中的作用。假定出现在塞诺利脂肪缺陷睾丸中的多核巨细胞被认为是由于生殖细胞合成症的畸形引起的。我们研究了这种现象在第一年发生的生殖细胞分化阶段，发现它出现在精子细胞的合子中 - 米形粉状阶段。今年，我们分析了细胞间交联的哪个阶段进行了转换。当通过荧光免疫染色分析细胞间交叉链接的定位时，发现在半脂脂缺乏的小鼠中，最初的精子细胞已经开始在精子早期的早期精子中进行多核化，并且此时构成了contincter的组成部分的定位，从而构成了crossize tex14的定位。这表明seminolipids可能有助于细胞间交联组成分子的定位调节。 2）Seminolipid在今年控制血液睾丸屏障中的作用，我们使用电子显微镜观察到了血液睾丸屏障。结果，证实了“衬有发达肌动蛋白纤维的细胞膜的接吻结构”，表明即使在缺乏塞诺脂蛋白缺乏睾丸中，功能紧密连接也存在。这表明可以在没有塞诺脂质的情况下建立紧密的键。接下来，当使用整个安装免疫染色观察到紧密连接的连续性存在或不存在时，在缺乏的塞诺利脂肪缺陷睾丸中证实了连续紧密连接带的形成。但是，此时，肌动蛋白纤维束中出现了一些磨损的东西。