多層オミックスとiPS技術,霊長類モデルを駆使した加齢性難聴への挑戦

利用多层组学、iPS 技术和灵长类动物模型应对与年龄相关的听力损失

• 批准号: 20K20409
• 负责人: 藤岡 正人
• 金额: $ 16.56万
• 依托单位: Kitasato University (2021-2022)Keio University (2019-2020)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K20409/
• 关键词: 加齢性難聴; GWAS; omics研究; imflammaging; ヒトiPS細胞; コモンマーモセット; omics解析; オミックス; iPS細胞創薬; マーモセット; iPS創薬

超高齢化社会を迎えて久しい本邦にとって重要な課題である加齢性難聴の病態理解と治療標的を同定すべく、本研究では(1)超高齢者の聴力を規定する一塩基多型(SNP)の探索同定と(2)小型霊長類コモンマーモセットでの遺伝子発現解析により病態に関与する候補遺伝子を絞り込み、(3)マウスモデルやヒトiPS技術でこれらの遺伝子の内耳細胞における役割やSNPが与える影響の機能評価を行うことで、内耳細胞の加齢性変化に影響を与える体質・遺伝子の同定と分子メカニズムの解明を目指す。研究実績概要： (1)(2)聴力検査を施行しデータ解析が可能であった400名超の健康長寿者の全ゲノム解析GWASを最新のimputation法を併用して行い、複数の聴力関連SNP候補を見出し、マーモセット内耳での研究で絞り込んだのち、GWASカタログを用いて再現性を確認した。このようにしてられた候補SNPからのinformaticsにより、高齢者の聴力と相関を示すpathwayとしてinflammagingの関与が示唆された。得られた候補SNPの近傍に既報の難聴遺伝子が存在するものについては、当該難聴患者から疾患iPS細胞を樹立した。(3)遺伝子改変マウスによる候補遺伝子のin vivoでの加齢性難聴の評価をすべく、C57BL6マウスの若年発症型進行性難聴の原因SNPを修復したマウスを導入し、基礎データとしてその聴力の加齢性変化を検討した。さらに、上述の遺伝性難聴についてモデルマウスの作成を開始した。なお、令和2年度はコロナ禍における施設方針により、令和3年度は学内の施設工事により、マウス研究のほぼ全てと、全てのiPS細胞研究が停止し、令和4年2月に研究代表者の異動により、iPS細胞やマウスを含めた全ての研究リソースの引越したため、研究は大幅に遅れている。

In order to understand the pathology and identify the therapeutic targets of age-related hearing loss, which is an important issue for Japan, which has been in a super-aging society for a long time, this study aims to identify the pathological conditions and molecular mechanisms that affect age-related changes in inner ear cells by (1) exploring and identifying single nucleotide polymorphisms (SNPs) that define hearing ability of ultra-old people, (2) narrowing down the candidate通过分析小灵长类动物公共果鼠的基因表达，以及（3）使用小鼠模型和人类IPS技术评估这些基因在内耳细胞中的作用以及SNP的作用，参与了病理条件。研究结果摘要：（1）（2）对400多名健康和长寿的个体进行了全基因组分析，他们能够通过进行听力测试来分析数据。使用最新的插补方法进行了GWAS，并发现了多个与听力相关的SNP候选者，并通过对Marmoset Inner Ear的研究缩小了范围，然后使用GWAS目录确认了可重复性。因此，SNP的信息学的信息学表明，炎症的参与是与老年人听力能力相关的途径。对于那些在候选SNP附近有听力损失基因的人，从听力损失患者中建立了患病的IPS细胞。 （3）为了评估通过转基因小鼠的体内年龄相关的候选基因的听力损失，引入了修复SNP的小鼠，这些小鼠被引入了C57BL6小鼠的早期发作累进性听力损失，并将其与年龄相关的变化视为基本数据。此外，上述遗传性听力损失开始了模型小鼠。此外，由于在Covid-19流行期间的设施政策，2020年，由于2021年校园的设施建设，几乎所有的鼠标研究和所有IPS细胞研究都被暂停，并于2022年2月，包括IPS细胞和小鼠在内的所有研究资源都因研究人员在2022年2月的转移而移动，因此该研究的转移是显着延迟的。

项目成果

同一家族の同胞間におけるGJB2変異難聴の聴力レベル差について

GJB2突变性听力损失同一家族兄弟姐妹听力水平差异

• 发表时间: 2022
• 期刊: 日本耳鼻咽喉科頭頸部外科学会会報
• 作者: 藤岡 正人;細谷 誠;奈良 利光;守本 倫子;阪本 浩一;大津 雅秀;仲野 敦子;有本 友季子;増田 佐和子;杉内 智子;益田 慎;森田 訓子;小川 郁;加我 君孝;松永 達雄
• 通讯作者: 松永 達雄

Cutting edge of the development of drugs for the deafness in 2022: What is the clinically meaningful improvement?

2022年耳聋药物研发前沿：临床上有意义的改善是什么？

• 发表时间: 2022
• 作者: Wakabayashi Mami;Sugiyama Yoshifumi;Takada Midori;Kinjo Aya;Iso Hiroyasu;Tabuchi Takahiro;Masato Fujioka
• 通讯作者: Masato Fujioka

Investigation of the hearing levels of siblings affected by a single GJB2 variant: Possibility of genetic modifiers

• DOI: 10.1016/j.ijporl.2021.110840
• 发表时间: 2021-07-19
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF PEDIATRIC OTORHINOLARYNGOLOGY
• 影响因子: 1.5
• 作者: Hosoya, Makoto;Fujioka, Masato;Matsunaga, Tatsuo
• 通讯作者: Matsunaga, Tatsuo

幹細胞生物学と霊長類モデルを用いた内耳性難聴の治療法開発

利用干细胞生物学和灵长类动物模型开发内耳听力损失的治疗方法

• 发表时间: 2020
• 期刊: Otology Japan
• 作者: 小泉光世，原田勇希，池田文人;尾上選哉;藤岡 正人
• 通讯作者: 藤岡 正人

内耳有毛細胞の製造方法、薬剤の評価方法、及び細胞分化誘導用組成物

内耳毛细胞的制造方法、药物评价方法以及诱导细胞分化的组合物

• 发表时间: 2021