多層オミックスとiPS技術,霊長類モデルを駆使した加齢性難聴への挑戦

利用多层组学、iPS 技术和灵长类动物模型应对与年龄相关的听力损失

• 批准号: 20K20409
• 负责人: 藤岡 正人
• 金额: $ 16.56万
• 依托单位: Kitasato University (2021-2022)Keio University (2019-2020)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K20409/
• 关键词: 加齢性難聴; GWAS; omics研究; imflammaging; ヒトiPS細胞; コモンマーモセット; omics解析; オミックス; iPS細胞創薬; マーモセット; iPS創薬

超高齢化社会を迎えて久しい本邦にとって重要な課題である加齢性難聴の病態理解と治療標的を同定すべく、本研究では(1)超高齢者の聴力を規定する一塩基多型(SNP)の探索同定と(2)小型霊長類コモンマーモセットでの遺伝子発現解析により病態に関与する候補遺伝子を絞り込み、(3)マウスモデルやヒトiPS技術でこれらの遺伝子の内耳細胞における役割やSNPが与える影響の機能評価を行うことで、内耳細胞の加齢性変化に影響を与える体質・遺伝子の同定と分子メカニズムの解明を目指す。研究実績概要： (1)(2)聴力検査を施行しデータ解析が可能であった400名超の健康長寿者の全ゲノム解析GWASを最新のimputation法を併用して行い、複数の聴力関連SNP候補を見出し、マーモセット内耳での研究で絞り込んだのち、GWASカタログを用いて再現性を確認した。このようにしてられた候補SNPからのinformaticsにより、高齢者の聴力と相関を示すpathwayとしてinflammagingの関与が示唆された。得られた候補SNPの近傍に既報の難聴遺伝子が存在するものについては、当該難聴患者から疾患iPS細胞を樹立した。(3)遺伝子改変マウスによる候補遺伝子のin vivoでの加齢性難聴の評価をすべく、C57BL6マウスの若年発症型進行性難聴の原因SNPを修復したマウスを導入し、基礎データとしてその聴力の加齢性変化を検討した。さらに、上述の遺伝性難聴についてモデルマウスの作成を開始した。なお、令和2年度はコロナ禍における施設方針により、令和3年度は学内の施設工事により、マウス研究のほぼ全てと、全てのiPS細胞研究が停止し、令和4年2月に研究代表者の異動により、iPS細胞やマウスを含めた全ての研究リソースの引越したため、研究は大幅に遅れている。

对于早已成为超级老龄化社会的日本来说，年龄相关性听力损失是一个重要问题，为了了解其病理学并确定治疗靶点，本研究旨在 (1) 鉴定单核苷酸多态性 (SNP)确定老年人的听力能力；）和（2）小型灵长类普通狨猴的基因表达分析。 (3) 使用小鼠模型和人类 iPS 技术对这些基因在内耳细胞中的作用以及 SNP 的影响进行功能评估，以确定内耳细胞年龄相关变化的影响，旨在识别构成/基因并阐明分子机制。 。研究结果总结：(1)(2)结合最新的插补方法对400多名接受听力测试并可进行数据分析的健康长寿者进行全基因组分析GWAS，鉴定出多个与听力相关的SNP通过对狨猴内耳的研究找到候选者并缩小范围后，我们使用 GWAS 目录确认了可重复性。以这种方式生成的候选 SNP 的信息表明，炎症参与了与老年人听力能力相关的途径。对于先前报道的耳聋基因存在于获得的候选SNP附近的情况，从听力损失患者中建立疾病iPS细胞。 (3)为了利用转基因小鼠的候选基因来体内评估与年龄相关的听力损失，我们引入了C57BL6小鼠中负责早发进行性听力损失的SNP被修复的小鼠，并使用了其听力的基础数据我们调查了与年龄相关的变化。此外，我们已经开始为上述遗传性听力损失创建小鼠模型。此外，2020年，由于与冠状病毒大流行相关的设施政策，以及2023年，由于大学内部的设施建设，几乎所有小鼠研究和所有iPS细胞研究都被暂停，首席研究员于2020年2月被停职。由于人员调动，包括iPS细胞和小鼠在内的所有研究资源都被转移，导致研究工作严重延误。

项目成果

同一家族の同胞間におけるGJB2変異難聴の聴力レベル差について

GJB2突变性听力损失同一家族兄弟姐妹听力水平差异

• 发表时间: 2022
• 期刊: 日本耳鼻咽喉科頭頸部外科学会会報
• 作者: 藤岡 正人;細谷 誠;奈良 利光;守本 倫子;阪本 浩一;大津 雅秀;仲野 敦子;有本 友季子;増田 佐和子;杉内 智子;益田 慎;森田 訓子;小川 郁;加我 君孝;松永 達雄
• 通讯作者: 松永 達雄

Cutting edge of the development of drugs for the deafness in 2022: What is the clinically meaningful improvement?

2022年耳聋药物研发前沿：临床上有意义的改善是什么？

• 发表时间: 2022
• 作者: Wakabayashi Mami;Sugiyama Yoshifumi;Takada Midori;Kinjo Aya;Iso Hiroyasu;Tabuchi Takahiro;Masato Fujioka
• 通讯作者: Masato Fujioka

Investigation of the hearing levels of siblings affected by a single GJB2 variant: Possibility of genetic modifiers

• DOI: 10.1016/j.ijporl.2021.110840
• 发表时间: 2021-07-19
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF PEDIATRIC OTORHINOLARYNGOLOGY
• 影响因子: 1.5
• 作者: Hosoya, Makoto;Fujioka, Masato;Matsunaga, Tatsuo
• 通讯作者: Matsunaga, Tatsuo

幹細胞生物学と霊長類モデルを用いた内耳性難聴の治療法開発

利用干细胞生物学和灵长类动物模型开发内耳听力损失的治疗方法

• 发表时间: 2020
• 期刊: Otology Japan
• 作者: 小泉光世，原田勇希，池田文人;尾上選哉;藤岡 正人
• 通讯作者: 藤岡 正人

内耳有毛細胞の製造方法、薬剤の評価方法、及び細胞分化誘導用組成物

内耳毛细胞的制造方法、药物评价方法以及诱导细胞分化的组合物

• 发表时间: 2021