κオピオイド受容体の慢性痛による睡眠障害への関わりを探究し臨床応用する

探讨κ阿片受体与慢性疼痛所致睡眠障碍的关系及临床应用

基本信息

批准号：
20K09216
负责人：
山崎光章
金额：
$ 2.75万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

慢性痛患者における痛みと睡眠障害は、相互に影響を及ぼし悪循環を形成するため同時に治療することが肝要である。痛みによるストレスが精神心理的障害を引き起こす機序としてκオピオイド受容体(KOR)が重要な役割を果たしている。しかし、KORを介したストレスが睡眠に与える影響は不明である。ここまでの我々の実験結果は薬物の全身投与によるものであり、KORの応答が睡眠に影響を与える神経学的な機序を推定することはできない。そこで、我々は視床下部室傍核のKORを特異的に操作し、KOR応答が睡眠に与える影響を調査した。【方法】以下の動物の脳波を測定し睡眠状態を評価した。①KOR発現細胞にのみCreリコンビナーゼを含有するマウス(KOR-cre)を用いて、室傍核に存在するKOR細胞に人工のGi共役型受容体(hM4Di)を発現させ、特異的リガンドであるClozapine N-oxide(CNO)によってhM4Diを刺激した。②坐骨神経結紮(PSNL)によって作成した神経障害性疼痛モデルの室傍核KORを、CRISPR-CAS9を搭載したプラスミドをマイクロインジェクションすることによってノックダウンさせた。【結果】hM4Diによる室傍核のKOR細胞刺激によって、U69,593同様に睡眠時間は減少し、non-REM睡眠の断片化が認められた。CRISPR-CAS9による室傍核KORのノックダウンは神経障害性疼痛モデルの睡眠時間の低下を改善し、non-REM睡眠の断片化を改善した。【結論】室傍核におけるKORの活性化は睡眠の障害に関与しており、KORの阻害は慢性痛に合併する睡眠障害を改善する可能性がある。

慢性疼痛患者的疼痛和睡眠障碍相互影响，形成恶性循环，因此同时治疗很重要。 Kappa 阿片受体 (KOR) 在疼痛引起的压力导致精神心理障碍的机制中发挥着重要作用。然而，KOR 介导的压力对睡眠的影响尚不清楚。到目前为止，我们的实验结果都是基于全身给药，我们无法估计 KOR 反应影响睡眠的神经机制。因此，我们专门操纵下丘脑室旁核中的 KOR，并研究 KOR 反应对睡眠的影响。 [方法]测量下列动物的脑电波并评价其睡眠状态。 ① 使用仅在KOR表达细胞中含有Cre重组酶的小鼠（KOR-cre），在室旁核的KOR细胞中表达人工Gi偶联受体（hM4Di），并注射特定配体氯氮平N.-氧化物(CNO) 刺激 hM4Di。 ② 通过坐骨神经结扎（PSNL）创建的神经病理性疼痛模型中的室旁核 KOR 通过显微注射携带 CRISPR-CAS9 的质粒而被敲除。 [结果] 与 U69,593 一样，hM4Di 对室旁核 KOR 细胞的刺激减少了睡眠时间，并且观察到非快速眼动睡眠碎片化。在神经病理性疼痛模型中，通过 CRISPR-CAS9 敲除室旁核 KOR 可改善睡眠持续时间缩短并改善非快速眼动睡眠碎片化。 [结论]室旁核KOR的激活与睡眠障碍有关，抑制KOR可能改善慢性疼痛相关的睡眠障碍。