Regulation mechanism of signaling pathway by exosomal miRNA from CAF in gastric cancer

CAF外泌体miRNA对胃癌信号通路的调控机制

• 批准号: 20K17625
• 负责人: 三木 友一朗
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Metropolitan University (2022)Osaka City University (2020-2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17625/
• 关键词: 胃癌; 微小環境; エクソソーム; Hippo pathway; miRNA; micro RNA; 癌周囲微小環境

本研究の目的は、CAFエクソソーム由来のmicroRNA (miRNA)による癌細胞内のシグナル伝達への影響、癌細胞制御メカニズムを解明し、またそれを通じて特定のmiRNAを新たなバイオマーカーとして 同定することである。細胞株レベルでは、intestinal typeのMKN74においてtotal YAPにおけるphospho YAPの割合が高く、逆にスキルスタイプの細胞株であるNUGC3において、 phospho YAPの発現割合が低いことがWestern blottingにおいて確認された。さらに現在までにCAF特有のexosomal miRNAを同定してきている。またHippo pathwayのKey moleculeであるYAPについて、特にスキルスタイプ、diffuse typeにおいて細胞質よりも核における発現が見られることを解明した。これはスキルスタイプの胃癌においては間質からのmiRNAによるシグナルによってHippo pathwayの中でYAPのリン酸化が行われないよう、調節が行われていることによると考えられる。また現在YAPのさらに下流に存在するAxl, CTGFなどの分子に関してTissue microarrayを用いた解析を進めている。本研究においてmiRNAがHippo pathwayを含む細胞内シグナルに与える影響を明らかにし、明らかにされた分子を標的とした治療薬開発に繋げることが最終的なゴールである。

本研究的目的是阐明 CAF 外泌体衍生的 microRNA (miRNA) 对癌细胞内信号转导和癌细胞控制机制的影响，并通过此鉴定特定的 miRNA 作为新的生物标志物。在细胞系水平上，通过Western blotting证实，实验型MKN74中磷酸化YAP占总YAP的比例较高，相反，硬质型细胞系NUGC3中磷酸化YAP的表达比例较低。此外，迄今为止，我们已经鉴定了 CAF 特异性的外泌体 miRNA。我们还发现，Hippo 通路中的关键分子 YAP 在细胞核中的表达量高于细胞质中的表达，尤其是在硬质型和弥漫型中。这被认为是由于在硬质型胃癌中，来自基质的 miRNA 信号调节 Hippo 通路中的 YAP 磷酸化。我们目前还在使用组织微阵列分析 YAP 下游的分子，例如 Axl 和 CTGF。这项研究的最终目标是阐明 miRNA 对细胞内信号（包括 Hippo 通路）的影响，并开发针对已识别分子的治疗药物。