疾患病態を反映するマクロファージの免疫形態学的指標の探索

寻找反映疾病病理的巨噬细胞免疫形态学指标

• 批准号: 20K07553
• 负责人: 遠田 悦子
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07553/
• 关键词: 単球; マクロファージ; FROUNT; ケモカイン; 細胞遊走; 白血球遊走; 細胞形態

マクロファージはケモカインなどの遊走因子の刺激を受けて炎症・傷害組織に浸潤し、微小環境に応じて多様な性質を獲得して炎症・免疫応答の中核を担っている。ケモカイン受容体会合分子FROUNTはマクロファージの細胞遊走を促進し、がんや炎症性疾患の増悪化に関与する。研究代表者はこれまでにFROUNTを欠損したマクロファージやFROUNT阻害剤で処理したマクロファージは糸状仮足に富む特有の形態を示すことを明らかにした。本研究ではマクロファージの機能と形態との相関や、疾患病態との関連を明らかにすることを目的とする。本年度は、炎症組織に集積した単球・マクロファージの形態的特徴と病態との関連を明らかにするため、糸球体腎炎を誘導した腎組織を用いて、糸球体に集積した単球・マクロファージの形態的特徴についてFROUNT阻害剤の投与の有無による違いを比較解析した。酵素抗体法によるマクロファージマーカーCD68の染色と低真空走査電子顕微鏡を組み合わせた手法により、炎症組織に浸潤した単球・マクロファージを同定した上で、その超微形態を観察した。FROUNT阻害剤投与群と非投与群で形態的特徴を比較し、FROUNT阻害剤投与群において単球・マクロファージの仮足形成が減弱し、細胞径が減少していることを見出した。形態的な特徴を定量化し、FROUNT阻害依存的な変化を捉えた。また、FROUNT阻害によって生じる単球・マクロファージの細胞形態の変化に伴う細胞内刺激応答シグナルの変化について、ウェスタンブロッティング、フローサイトメトリーを用いて細胞内シグナル伝達分子の活性化状態の変化を解析した。

当受到趋化因子等迁移因子刺激时，巨噬细胞会渗透到发炎和受伤的组织中，根据微环境获得不同的特性，并在炎症和免疫反应中发挥核心作用。趋化因子受体相关分子FROUNT促进巨噬细胞迁移，参与癌症和炎症性疾病的加重和恶化。主要研究者之前已经表明，缺乏 FROUNT 的巨噬细胞和用 FROUNT 抑制剂处理的巨噬细胞表现出富含丝状伪足的独特形态。本研究的目的是阐明巨噬细胞功能和形态的相关性，以及与疾病病理学的关系。今年，为了明确炎症组织中积累的单核细胞和巨噬细胞的形态特征与病理状况之间的关系，我们将使用诱发肾小球肾炎的肾组织来研究肾小球中积累的单核细胞和巨噬细胞的形态。分析了服用和未服用 FROUNT 抑制剂的患者之间身体特征的差异。通过酶联抗体法对巨噬细胞标记物 CD68 的染色和低真空扫描电子显微镜相结合，我们鉴定了浸润炎症组织的单核细胞和巨噬细胞，然后观察了它们的超细形态。我们比较了 FROUNT 抑制剂处理组和未处理组之间的形态学特征，发现 FROUNT 抑制剂处理组中单核细胞和巨噬细胞的伪足形成减弱，细胞直径减小。我们量化了形态特征并捕获了依赖于 FROUNT 抑制的变化。此外，我们使用蛋白质印迹和流式细胞术分析了细胞内信号分子激活状态的变化，以检查与 FROUNT 抑制引起的单核细胞和巨噬细胞细胞形态变化相关的细胞内刺激反应信号的变化。

项目成果

Inhibition of the chemokine signal regulator FROUNT by disulfiram ameliorates crescentic glomerulonephritis

双硫仑抑制趋化因子信号调节剂 FROUNT 可改善新月体肾小球肾炎

• DOI: 10.1016/j.kint.2022.07.031
• 发表时间: 2022
• 影响因子: 19.6
• 作者: Toda Etsuko;Sawada Anri;Takeuchi Kazuhiro;Wakamatsu Kyoko;Ishikawa Arimi;Kuwahara Naomi;Sawa Yurika;Hatanaka Saeko;Kokubo Kana;Makino Kosho;Takahashi Hideyo;Endo Yoko;Kunugi Shinobu;Terasaki Mika;Terasaki Yasuhiro;Matsushima Kouji;Terashima Yuya;Shimizu A
• 通讯作者: Shimizu A

Heavy Metal Enhancement Technique for Diaminobenzidine in Immunohistochemistry Enables Ultrastructural Observation by Low-vacuum Scanning Electron Microscopy

免疫组织化学中二氨基联苯胺的重金属增强技术可通过低真空扫描电子显微镜进行超微结构观察

• DOI: 10.1369/00221554221102996
• 发表时间: 2022
• 作者: Arai Yutaka;Takeuchi Kazuhiro;Hatanaka Saeko;Ishikawa Arimi;Inoue Taichi;Takakuma Shoichiro;Kajimoto Yusuke;Toda Etsuko;kunugi Shinobu;Terasaki Mika;Shimizu Akira
• 通讯作者: Shimizu Akira

日本医科大学解析人体病理学教室ホームページ

日本医科大学分析人体病理学系主页

Disulfiram Ophthalmic Solution Inhibited Macrophage Infiltration by Suppressing Macrophage Pseudopodia Formation in a Rat Corneal Alkali Burn Model

双硫仑滴眼液通过抑制大鼠角膜碱烧伤模型中巨噬细胞伪足的形成来抑制巨噬细胞浸润

• DOI: 10.3390/ijms24010735
• 发表时间: 2023-01-01
• 期刊: International Journal of Molecular Sciences
• 影响因子: 5.6
• 作者: Toyo Ikebukuro;Takeshi Arima;Momoko Kasamatsu;Yuji Nakano;Yutaro Tobita;Masaaki Uchiyama;Y. Terashima;E. Toda;Akira Shimizu;Hiroshi Takahashi
• 通讯作者: Hiroshi Takahashi

Heavy Metal Enhancement Technique for Diaminobenzidine in Immunohistochemistry Enables Ultrastructural Observation by Low-vacuum Scanning Electron Microscopy

免疫组织化学中二氨基联苯胺的重金属增强技术可通过低真空扫描电子显微镜进行超微结构观察

• DOI: 10.1369/00221554221102996
• 发表时间: 2022
• 作者: Arai Yutaka;Takeuchi Kazuhiro;Hatanaka Saeko;Ishikawa Arimi;Inoue Taichi;Takakuma Shoichiro;Kajimoto Yusuke;Toda Etsuko;kunugi Shinobu;Terasaki Mika;Shimizu Akira
• 通讯作者: Shimizu Akira