Role of membrane lipid-modulated signal transductions in endotoxin hyperresponse of fatty livers

膜脂调节信号转导在脂肪肝内毒素高反应中的作用

• 批准号: 20K07349
• 负责人: Qin XianYang
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07349/
• 关键词: 非アルコール性脂肪性肝炎; 脂肪肝; トランスグルタミナーゼ; エンドトキシン; 微小環境; マルチオミクス解析; ホスファチジルエタノールアミン; LIMK1; in situイメージング; NASH; 膜脂質; 膜タンパク質

本研究では、脂肪肝の微小環境において細菌性エンドトキシン（LPS）誘発性炎症反応並びに非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）の発症において分子間接着因子トランスグルタミナーゼ（TG2）の役割の解明を目的とする。本年度は、１）NASH病態STAMマウスと高濃度LPS誘発性炎症マウスにおいて、TG2は肝組織中CD80＋F4/80＋M1型マクロファージに特異的に活性化されることを見出した。RNA-seq解析を用いて、クロドロン酸内包リポソーム投与によりマクロファージ排除したマウスとTG2阻害剤シスタミン（CTM）投与マウスにおいて、LPS刺激による肝組織中の遺伝子発現変化を比較し、LPS刺激に対する同様な炎症抑制効果を示した。2）ヒト肝がん細胞JHH7とマウスマクロファージ細胞 Raw264.7を用いて、ホスファチジルエタノールアミン（PE）処理によるLPS応答性への影響を検証した。IL-6遺伝子発現はPEの前処理によりLPS刺激に対する反応性が有意に増加した。3）Raw264.7細胞を用いてLPS刺激とTG2活性化の関連性を検証した。Raw264.7細胞においてLPS処理によりTG2の架橋酵素活性と遺伝子・タンパク質発現が有意に増加した。CTMは、LPSによるIL-6やTNFα遺伝子発現の上昇やマクロファージの細胞死が有意に抑制した。さらに、LPSで刺激したマクロファージの培地から得られた上清を用いて、条件培地（CM）を作成した。このCMは正常肝細胞HcのIL-6遺伝子を強く誘導したが、CTM添加により有意に抑制された。これらの結果から、TG2はLPS-TLRシグナルカスケードだけでなく、LPS刺激による分泌されるサイトカインやその下流受容体シグナルカスケード、そして炎症微小環境においてマクロファージと肝細胞との細胞間相互作用にも関与していることが示唆された。

在本研究中，我们旨在阐明分子粘附因子转谷氨酰胺酶（TG2）在脂肪肝微环境中细菌内毒素（LPS）诱导的炎症反应和非酒精性脂肪性肝炎（NASH）发展中的作用。今年，我们发现1）TG2在NASH病理的STAM小鼠和高浓度LPS诱导的炎症小鼠的肝组织中被CD80+F4/80+M1型巨噬细胞特异性激活。使用RNA-seq分析，我们比较了通过施用含氯膦酸盐脂质体消除巨噬细胞的小鼠和施用TG2抑制剂胱胺（CTM）的小鼠中LPS刺激诱导的肝组织中的基因表达变化，显示出抑制作用。 2）使用人肝癌细胞JHH7和小鼠巨噬细胞Raw264.7，我们验证了磷脂酰乙醇胺（PE）治疗对LPS反应性的影响。通过 PE 预处理，IL-6 基因表达响应 LPS 刺激而显着增加。 3)我们使用Raw264.7细胞验证了LPS刺激和TG2激活之间的关系。 LPS 处理显着增加 Raw264.7 细胞中 TG2 交联酶活性和基因/蛋白质表达。 CTM 显着抑制 LPS 诱导的 IL-6 和 TNFα 基因表达增加以及巨噬细胞死亡。此外，使用从用LPS刺激的巨噬细胞的培养基获得的上清液制备条件培养基(CM)。该CM强烈诱导正常肝细胞Hc中的IL-6基因，添加CTM后该基因被显着抑制。这些结果表明，TG2不仅参与LPS-TLR信号级联，还参与LPS刺激分泌的细胞因子、其下游受体信号级联以及炎症微环境中巨噬细胞和肝细胞之间的细胞间相互作用。

项目成果

トランスグルタミナーゼを標的とした敗血症治療への応用と分子基盤の理解

转谷氨酰胺酶治疗脓毒症的应用及其分子基础的理解

• 发表时间: 2021
• 作者: 秦咸陽;Ting Su;古谷裕;小嶋聡一
• 通讯作者: 小嶋聡一

Latency-associated Peptide Degradation Fragments Produced in Stellate Cells and Phagocytosed by Macrophages in Bile Duct-ligated Mouse Liver

胆管结扎小鼠肝脏中星状细胞产生并被巨噬细胞吞噬的潜伏期相关肽降解片段

• DOI: 10.1369/00221554211053665
• 发表时间: 2021
• 作者: Inoue Ikuyo;Qin Xian;Masaki Takahiro;Mezaki Yoshihiro;Matsuura Tomokazu;Kojima Soichi;Furutani Yutaka
• 通讯作者: Furutani Yutaka

Establishment of a Rapid Detection System for ISG20-Dependent SARS-CoV-2 Subreplicon RNA Degradation Induced by Interferon-α

干扰素-α诱导的ISG20依赖性SARS-CoV-2亚复制子RNA降解快速检测系统的建立

• DOI: 10.3390/ijms222111641
• 发表时间: 2021
• 影响因子: 5.6
• 作者: Furutani Yutaka;Toguchi Mariko;Higuchi Shoko;Yanaka Kaori;Gailhouste Luc;Qin Xian;Masaki Takahiro;Ochi Sae;Matsuura Tomokazu
• 通讯作者: Matsuura Tomokazu

Non-Genomic Control of Dynamic MYCN Gene Expression in Liver Cancer

肝癌动态 MYCN 基因表达的非基因组控制

• DOI: 10.3389/fonc.2020.618515
• 发表时间: 2021
• 影响因子: 4.7
• 作者: Qin Xian;Gailhouste Luc
• 通讯作者: Gailhouste Luc

Chemoprevention by vitamin A and its derivatives

维生素 A 及其衍生物的化学预防

• 发表时间: 2022
• 作者: Xian