神経線維腫症1型の特性から解明するScarless Wound Healing

从1型神经纤维瘤病的特点阐明无疤痕伤口愈合

基本信息

批准号：
21K09763
负责人：
大石真由美
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

現在行われている瘢痕治療の効果は限定的であり、手術や外傷後に傷あとが残ることは不可避である。一方、神経線維腫症１型（NF-1）では手術後の瘢痕が目立ちにくく、肥厚性瘢痕やケロイドを生じにくいことが経験的に知られているが、NF-1の創傷治癒過程における過剰な瘢痕形成を抑制するメカニズムは明らかではない。本研究の目的は、NF-1の創傷治癒から瘢痕抑制のメカニズムを解明し、scarless wound healingを可能とする新規治療薬を開発することである。昨年度までにNF-1患者・非患者をリクルートし、ヒト皮膚線維芽細胞を用いた実験系を確立した。ドナーから採取した皮膚組織から線維芽細胞の単離培養し、安定的な継代と核酸抽出に成功した。本年度はより生体内に近い創傷環境を培養線維芽細胞で再現するためのTGFβ-1刺激条件の確立に焦点をあてて詳細な検討を行った。NF-1非患者から単離培養した正常皮膚線維芽細胞の培養液中へTGFβ-1 10ng/mlと1%FBSを24時間添加し、主要な創傷治癒関連遺伝子のmRNA発現量を定量した。その結果、TGFβ-1刺激後に筋線維芽細胞マーカーであるαSMA・TAGLNの発現量や組織修復に必要なⅠ型コラーゲンを構成するCOL1A2の発現量が上昇することが確認できた。

目前的疤痕治疗方法效果有限，手术或外伤后不可避免地会留下疤痕。另一方面，根据经验已知1型神经纤维瘤病（NF-1）术后疤痕不太明显，不太可能产生肥厚性疤痕或疤痕疙瘩；抑制疤痕形成的机制尚不清楚。本研究的目的是阐明 NF-1 抑制伤口愈合疤痕的机制，并开发新的治疗剂，使伤口愈合无疤痕。到去年，我们已经招募了 NF-1 患者和非患者，并建立了一个使用人类皮肤成纤维细胞的实验系统。我们从供体收集的皮肤组织中分离培养成纤维细胞，并成功稳定传代和核酸提取。今年，我们进行了详细的研究，重点是建立 TGFβ-1 刺激条件，以在培养的成纤维细胞中重现更类似于体内的伤口环境。在非 NF-1 患者分离培养的正常皮肤成纤维细胞的培养基中加入 10 ng/ml TGFβ-1 和 1% FBS 24 小时，定量主要伤口愈合相关基因的 mRNA 表达水平。结果证实，肌成纤维细胞标记物αSMA和TAGLN以及构成组织修复所需的I型胶原的COL1A2的表达水平在TGFβ-1刺激后增加。