The role of macrophages in chronic rejection after lung transplantation and regulatioon of macrophage activities by FROUNT inhibition

巨噬细胞在肺移植后慢性排斥反应中的作用及FROUNT抑制对巨噬细胞活性的调节

基本信息

批准号：
21K08898
负责人：
佐藤雅昭
金额：
$ 2.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08898/
关键词：
肺移植拒絶マクロファージ拒絶反応慢性拒絶ケモカイン

项目摘要

肺移植後の急性拒絶反応は、長期生命予後に影響を及ぼす慢性拒絶の危険因子となり得る。近年、本拒絶の病態解明が進み、リンパ球のみならずマクロファージによっても惹起される可能性が提唱されている。抗酒癖薬であるジスルフィラム（Disulfiram, DSF）は、マクロファージの細胞遊走シグナルを促進する細胞内制御分子 FROUNT の阻害薬である。今回、DSF をラット肺移植後急性拒絶モデルに投与しvehicleコントロールと比較したところ、各群の A grade スコア（末梢肺での拒絶スコア）の中央値は各々、コントロール群で Grade A2.5、DSF群でGrade A2 であり、両群間で差はなかった（p=0.321）。しかし気道の拒絶を表すB grade はコントロール群で Grade B2R、DSF群でGrade B1RでありB grade は両群間で統計学的に有意差が認められた（p=0.0031）。免疫染色では、CD68 陽性マクロファージ数と CD3 陽性 T 細胞数は、DSF群においてコントロール群よりも優位に少なかった（p=0.0001, p=0.0029）。移植肺の気管支肺胞洗浄中のマクロファージの割合はDSF群で有意に少なかった（p=0.032）。発現変動遺伝子の検出（DEG 解析）ではDSF群の炎症性サイトカイン IL-6 の遺伝子発現低下やマクロファージ関連遺伝子(CD86, CD163)の発現低下、関連ケモカイン（CCL2, CCL7)の発現低下がみられ、抗炎症サイトカインIL-10の遺伝子発現の上昇傾向を認めた。以上より、本研究ではラット肺移植モデルにおいて、DSF投与によるマクロファージの遊走抑制とリンパ球性細気管支炎（気管支の拒絶）の軽減が得られることを示した。

肺移植后的急性排斥反应可能是慢性排斥反应的危险因素，影响长期生存结果。近年来，在阐明这种排斥反应的病理学方面取得了进展，有人提出，它可能不仅由淋巴细胞引起，也可能由巨噬细胞引起。双硫仑 (DSF) 是一种抗酒精药物，是 FROUNT 的抑制剂，FROUNT 是一种细胞内调节分子，可促进巨噬细胞中的细胞迁移信号。此次，对肺移植后的大鼠急性排斥模型进行给药，与载体对照相比，两组的等级均为A2，两组之间没有差异（p=0.321）。然而，表示气道排斥反应的B级在对照组中为B2R级，在DSF组中为B1R级，并且两组之间的B级存在统计学显着差异（p=0.0031）。免疫染色显示，DSF组中CD68阳性巨噬细胞和CD3阳性T细胞的数量显着低于对照组（p=0.0001，p=0.0029）。 DSF 组移植肺支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞的比例显着较低（p=0.032）。差异表达基因检测（DEG分析）显示，DSF组炎症细胞因子IL-6基因表达降低，巨噬细胞相关基因（CD86、CD163）表达降低，相关趋化因子（CCL2、CCL7）表达降低。观察到抗炎细胞因子 IL-10 基因表达增加的趋势。基于上述，本研究表明，在大鼠肺移植模型中，DSF 给药可抑制巨噬细胞迁移并减轻淋巴细胞性细支气管炎（支气管排斥）。