レニン-アンジオテンシン系最終段階因子ＡＴ４の新規高感度測定法による病態解析

使用新的高灵敏度测量方法对肾素-血管紧张素系统末期因子AT4进行病理分析

• 批准号: 21K08273
• 负责人: 此下 忠志
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08273/
• 关键词: レニン－アンジオテンシン系; アンジオテンシンIV受容体; LNPEP; 遺伝子多型; 高血圧; 慢性腎臓病; 糖尿病; 妊娠高血圧腎症（子癇前症）; 高血圧学; レニン-アンジオテンシン系; アンジオテンシン受容体; AT4

これまで腎組織の網羅的発現解析から、高血圧/糖尿病に特異的な遺伝子、アンジオテンシンIV受容体（AT4）を抽出した。この分子はレニン-アンジオテンシン系の構成要素であると同時に、インスリン調節性アミノペプチダーゼ（IRAP）と同一分子であり糖代謝にも関与する。即ち血圧異常と代謝障害とを繋ぐKey Moleculeである可能性が示唆される。そこで可溶成分に対しポリクローナル抗体で感度1.0μg/mlの測定系を確立し、生活習慣病のバイオマーカーとなることが期待された（科研費C、平成22～24年）。次にモノクローナル抗体による改善を図り、感度20 pg/mlの高感度測定系を独自開発した（科研費C、平成25～27年）。さらに同遺伝子多型を解析し、症例対照研究で、血漿濃度は、肥満者、CKD症例で有意に低値となった。またAT4の1遺伝子多型により濃度差のあることが判明し、測定系の正当性が裏打ちされるとともにAT4濃度は遺伝子型の中間表現型となり得るという重要な可能性が出てきた（科研費C、平成29～令和元年）。今回、AT4（遺伝子型と血漿濃度）が前向き評価により心血管病、透析導入、死亡などとの相関を解析し、さらに内分泌疾患や妊娠関係病態と相関を解析する。これによりバイオマーカーとしての意義と有用性を一層高める。2年目は予定通り、1）対象・試料の収集とデータベースのさらなる整備。2）ほぼ方法の確立している測定系に対するロット間ばらつきの調整、希釈限界の適正化の継続。3）対象を従来の高血圧、CKD、糖尿病等から内分泌系疾患や妊娠関連病態へ広げつつの測定推進の遂行。4）遺伝子多型の解析の適正化等を実施し得た。

通过对肾组织的全面表达分析，我们提取了高血压/糖尿病特有的基因血管紧张素IV受体（AT4）。该分子是肾素-血管紧张素系统的组成部分，也是与胰岛素调节氨肽酶（IRAP）相同的分子，IRAP也参与糖代谢。换句话说，这表明它可能是连接血压异常和代谢紊乱的关键分子。因此，利用针对可溶性成分的多克隆抗体建立了灵敏度为1.0μg/ml的测量系统，并希望将其作为生活方式相关疾病的生物标志物（科学研究补助金C， 2010-2010）。接下来，我们尝试使用单克隆抗体改进结果，并开发了一种独特的高灵敏度测量系统，灵敏度为20 pg/ml（KAKENHI C，2013-2017）。对该基因多态性的进一步分析表明，在病例对照研究中，肥胖个体和慢性肾病患者的血浆浓度显着较低。此外，还发现AT4中的单基因多态性导致浓度存在差异，证实了测量系统的有效性，并提出了AT4浓度可能是基因型之间的中间表型的重要可能性（KAKENHI Grants-in-科学研究援助）C，2017-2019）。此次，我们将对AT4（基因型和血浆浓度）进行前瞻性评估，分析其与心血管疾病、透析开始、死亡等的相关性，并进一步分析其与内分泌疾病、妊娠相关病理的相关性。这进一步增强了其作为生物标志物的重要性和实用性。第二年，按计划：1）收集主题/样本并进一步开发数据库。 2) 使用几乎已建立的方法继续调整批次间差异并优化测量系统的稀释限度。 3）推动测量范围从传统的高血压、CKD、糖尿病等扩大到内分泌疾病和妊娠相关病理。 4）我们能够优化遗传多态性的分析。

项目成果

Hormone-sensitive lipase protects adipose triglyceride lipase-deficient mice from lethal lipotoxic cardiomyopathy.

激素敏感脂肪酶可保护脂肪甘油三酯脂肪酶缺乏的小鼠免受致命的脂毒性心肌病。

• DOI: 10.1016/j.jlr.2022.100194
• 发表时间: 2022
• 影响因子: 6.5
• 作者: Yamada M; Suzuki J*; Sato S; Zenimaru Y; Saito R; Konoshita T; Kraemer FB; Ishizuka T
• 通讯作者: Ishizuka T

研究者の最新動向：トランスクリプトーム解析により抽出した新RA系因子AT4の分子遺伝学的解析．

研究人员最新动向：通过转录组分析提取的新的RA相关因子AT4的分子遗传学分析。

• 发表时间: 2021
• 作者: 此下忠志

クワズルナタール大学(南アフリカ)

夸祖鲁纳塔尔大学（南非）

The association of NPHS1 and ACNT4 gene polymorphisms with Pre-eclampsia.

NPHS1 和 ACNT4 基因多态性与先兆子痫的关联。

• DOI: 10.1016/j.ejogrb.2021.09.006
• 发表时间: 2021
• 作者: Khaliq OP; Konoshita T; Moodley J; Naicker T
• 通讯作者: Naicker T

Aminopeptidase A (ENPEP) gene polymorphisms and preeclampsia: Descriptive analysis.

氨基肽酶 A (ENPEP) 基因多态性和先兆子痫：描述性分析。

• DOI: 10.1016/j.ejogrb.2020.12.051
• 发表时间: 2021
• 作者: Aung M; Konoshita T; Moodley J; Naicker T; Khaliq OP; Connolly C; Gathiram P
• 通讯作者: Gathiram P