難治性の神経因性疼痛を抑制する脳由来新規生理活性物質の構造決定と生理作用の解析

抑制顽固性神经病理性疼痛的新型脑源性生理活性物质的结构测定和生理作用分析

• 批准号: 20K07768
• 负责人: 池田 哲也
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyoto Tachibana University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07768/
• 关键词: アロディニア; APGWamide; 神経因性疼痛; 神経障害性疼痛; CCIモデルラット; 絞扼性神経障害モデル; 絞扼性神経損傷モデル; pain; 慢性疼痛; 座骨神経圧迫モデル

本研究は、神経因性疼痛患者に見られるアロディニアの効果的な治療薬の開発を目指し、神経因性疼痛モデルラットに見られる疼痛行動であるアロディニアをバイオアッセイ系に用いて、ニワトリ脳神経系から新規抗アロディニア活性物質を単離精製し、その立体構造を明らかにし、生理活性を詳細に解析することを目的にしている。まず、効率よく精製を進めていくためバイオアッセイ系の開発を行った。飼育の容易さ、動物に与える苦痛の軽減、また、アロディニアを示すまでの期間を短縮するために、ラットの座骨神経を圧迫するCCI（絞扼性神経損傷）モデルを開発した。CCIモデルは腸由来の吸収糸で座骨神経を絞扼し、慢性の絞扼損傷を引き起こす方法が一般的であるが、本研究ではポリプロピレン（PP）のチューブを用いて神経を圧迫する方法を用いた。圧迫するPPチューブの直径の検討、圧迫する座骨神経の部位、圧迫する範囲等を工夫することによって効率よくCCIモデルを作ることが出来るようになった。このCCIモデルラットをバイオアッセイに用いて、800羽分のニワトリ脳組織をホモジナイズし、ゲルろ過、数段階のHPLCから得られた画分をアッセイして、数種の活性画分を得ることが出来た。昨年度は、紫外吸収でシングルピークを示す精製物を得ることが出来、2種の物質について、分析を行った。非常に量が少なかったため、構造決定は至らなかった。本年度はさらに精製を進めると共に、他の画分の活性も検討した。まだ、最終精製にいたっておらず、来年度まで研究期間を延長した。今年度は、本研究の申請書の計画に挙げた「①新規抗アロディニア活性物質の単離精製法の確立、②構造解析、③合成物を作製し、生理機能を明らかにする」の中で、「①新規抗アロディニア活性物質の単離精製法の確立」と「②構造解析」まで進めることができた。

这项研究旨在开发有效的神经性疼痛患者异常性疾病的治疗剂，并使用异肌症，在生物测定系统中，在神经性疼痛模型大鼠中看到的一种疼痛行为，以分离出新型的抗乳肌神经系统的活性药物与鸡肉颅神经系统中，阐明其三维结构，并分析其三维结构，并分析其物理学活动。首先，开发了生物测定系统以进行纯化有效地进行。开发了一种压缩大鼠坐骨神经的CCI（舒适的神经损伤）模型，以减轻饲养，减轻对动物造成的疼痛，并缩短表现出异常性疾病所需的时间。 CCI模型是一种常见的方法，其中坐骨神经被肠道吸收缝合线扼杀以引起慢性绞死损伤，但是在这项研究中，使用聚丙烯（PP）管来压缩神经。通过检查压缩PP管的直径，设计压缩坐骨神经的位置以及压缩压力的面积，可以有效地创建CCI模型。该CCI模型大鼠用于生物测定中，以分析从HPLC的几个阶段获得的800个鸡脑组织，凝胶过滤和分数，以获得几个活性分数。去年，通过紫外线吸收获得了表现出单个峰的纯化产品，并分析了两种类型的物质。由于数量很少，因此没有做出结构确定。今年，进行了进一步的纯化，还检查了其他分数的活动。最终的纯化尚未完成，研究期限已延长到明年。今年，我们能够继续“ 1）建立一种新型抗乳杆菌活性物质的隔离和纯化方法”和“ 2）结构分析，以及3）制备复合材料以阐明生理功能，在本研究的应用形式中列出了生理功能”。

项目成果

The effect of the analogue peptides of APGWamide on rat models of inflammatory and neuropathic pain

APGWamide类似肽对大鼠炎症和神经病理性疼痛模型的影响

• 发表时间: 2021
• 作者: Ryota Sawami;Ayumi Nakaya;Reina Fujimura;Futaba Nishikawa;Yuzuho Yoshii and *Tetsuya Iked
• 通讯作者: Yuzuho Yoshii and *Tetsuya Iked

The effect of a peptide hormone, oxytocin, on a rat model of neuropathic pain

肽激素催产素对神经性疼痛大鼠模型的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: Ryo Okumura;Jun Kato and Tetsuya Ikeda
• 通讯作者: Jun Kato and Tetsuya Ikeda