A mechanism underlying the inhibition of steatohepatitis via FoxO3

FoxO3 抑制脂肪性肝炎的机制

基本信息

批准号：
21K11595
负责人：
小松利光
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K11595/
关键词：
Foxo3 非アルコール性脂肪肝炎肝がん NASH 肝臓マクロファージ

项目摘要

肝細胞特異的Foxo3欠失マウス（LKO）は、脂肪肝にはなるが非アルコール性脂肪肝炎（NASH）に進行しない。Foxo3転写因子は、肝臓の脂肪合成や老化の基盤となる細胞レベルの軽微な炎症を制御すると考えられることから、炎症を惹起されやすいマクロファージ特異的Foxo3欠失マウス（Lysm-Foxo3KO）とLKOマウスを交配したダブルコンディショナル欠失マウス（dcKO）で通常飼料（RD）によるNASH誘導を試みた。しかしながら52週齢時点で、dcKOマウスの体重、摂食量に有意な増加は見られなかった。線維化誘導負荷をかけるため55週齢から一部マウスに高脂肪食（HFD）を与えて6ヶ月間飼育したところ、dcKO-HFD群で有意に体重が減少し、肉眼的に50％（2/4匹）で肝がんが認められた。低体重マウスと肝がん個体は一致していることから、がんによる体重減少と考えられる。コントロール（Cnt）-HFD群では肝がんは観察されなかった。また、通常食群ではCnt、dcKOマウスともに異常は認められなかった。上述のモデルとは別に、Cnt、LKOマウスにGAN飼料（高脂肪・高コレステロール・フルクトース）を与えて人工的にNASH化誘導する実験群を作製し、Foxo3欠失による影響を検証した。GAN開始後32週（44週齢）、38週経過時点（50週齢）のdcKOマウスの体重・摂食量は、Cntマウスと有意差はなかった。肉眼的に肝臓がんと見られる所見は各群１検体ずつ観察された。線維化進行度を検証するため、50週齢モデル（n=4）でシリウスレッド染色を行い、オールインワン蛍光顕微鏡（BZ-X700、キーエンス）で対物20倍・約400視野での染色面積を測定した。その結果、LKO-GANマウスで線維化が多い傾向が見られたが、統計的有意差はなかった。

肝细胞特异性 Foxo3 缺失 (LKO) 的小鼠会出现脂肪肝，但不会进展为非酒精性脂肪性肝炎 (NASH)。 Foxo3 转录因子被认为可以在细胞水平上控制轻微炎症，这是肝脏脂肪合成和衰老的基础。我们尝试在繁殖的双条件缺失小鼠 (dcKO) 中使用正常饮食 (RD) 诱导 NASH。然而，在52周龄时，没有观察到dcKO小鼠的体重或食物摄入量显着增加。当一些小鼠从55周龄开始喂食高脂饮食（HFD）并饲养6个月以施加诱导纤维化的负荷时，dcKO-HFD组的体重显着下降，并且体重下降50%（2 /4 动物）观察到肝癌。由于低体重小鼠和患有肝癌的个体是相同的，因此认为体重减轻是由于癌症引起的。对照组（Cnt）-HFD 组未观察到肝癌。此外，正常饮食组的 Cnt 或 dcKO 小鼠均未观察到异常。除上述模型外，我们还创建了一个实验组，用GAN饲料（高脂肪、高胆固醇、果糖）喂养Cnt和LKO小鼠，人工诱导NASH形成，并检测Foxo3缺失的影响。 GAN开始后32周（44周龄）和38周（50周龄）dcKO小鼠的体重和食物摄入量与Cnt小鼠没有显着差异。在每组的一份标本中观察到肝癌的肉眼可见的发现。为了验证纤维化进展的程度，对 50 周龄模型（n = 4）进行天狼星红染色，并使用一体式荧光显微镜（BZ-X700，Keyence ）具有 20 倍物镜和大约 400 个视野。结果显示，LKO-GAN小鼠倾向于出现更多的纤维化，但没有统计学上的显着差异。