口腔常在菌のreplaceによる歯周病予防ツールの開発

通过替换口腔常驻细菌开发牙周病预防工具

• 批准号: 21K10239
• 负责人: 田中 とも子
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10239/
• 关键词: バイオフィルム; Red Complex; 歯周病; replacement therapy; バイオフィルム; Red Complex; 歯周病; replacement therapy

本研究は口腔常在菌のreplaceによるバイオフィルム形成抑制効果について検討し、口腔バイオフィルムの健全化による歯周病予防ツール開発を最終目的とする。本年度は歯周病原細菌４菌種を用いて、歯根上へのバイオフィルム形成を試みた。さらに、人工バイオフィルムの経時的変化を確認した。使用菌株はPorphyromonas gingivalis (P. g) ATCC33277、Tannerella forsythia (T. f) ATCC43037、Treponema denticola (T. d) ATCC35405、Fusobacterium nucleatum（F. n）ATCC 25586、Streptococcus gordonii (S. g) ATCC10558である。バイオフィルム形成には、0.1％ N-acetylmuramic acid添加TYGVS 培地を用い、昨年度と同様の方法でヒト歯・歯根の切片上に行った。はじめにODを1.0に調整したS.g懸濁液を、被験切片が設置された容器内に満たし、24時間培養した。次いで懸濁液を除去し、各ODを1.0に調整したP. g、T. f、T. dとF. nの懸濁液を被験切片が設置された容器内に入れ、さらに嫌気条件下（90％N2、５％CO2）で24時間培養した。バイオフィルムの観察はSEMにて行った。また、菌叢解析はOD 0.5、1.5の各細菌懸濁液を用いた人工バイオフィルムについても試みた。SEM観察の結果、５菌種すべてがセメント質上に付着し、バイオフィルム形成が確認された。菌叢解析から人工バイオフィルムの成熟度および細菌密度の違いによって、動態が異なることが明らかになった。人工バイオフィルムを用いたシミュレーションを行うにあたっては細菌密度の条件などさらなる検討が必要であると考えられた。

这项研究研究了抑制生物膜形成的口服驻留细菌的作用，最终目的是开发一种工具来通过确保健康的口服生物膜来预防牙周疾病。今年，我们尝试使用四种牙周致病细菌在根部形成生物膜。此外，随着时间的推移，人工生物膜的变化得到了证实。所使用的菌株是牙龈卟啉单胞菌（P. G）ATCC3277，Tannerella Forsythia（T。F）ATCC43037，Treponema denticola（T. d）ATCC35405，fusobacterium nucLeatum（F. n）Atcc 25586 atcc 25586和ptrepteptoccus gordeptoccus fusobacterium nucleatum（F. n）。对于生物膜的形成，使用了补充了0.1％N-乙酰基瘤酸的Tygvs培养基，并以与去年相同的方式将人牙和根部切片。首先，将OD调整为1.0的S.G悬浮液被填充到一个容器中，将测试部分放置并培养24小时。然后除去悬浮液，并将调整至1.0的每个OD的悬浮液放置在放置测试部分的容器中，并在厌氧条件下（90％N2，5％CO2）进行进一步培养24小时。生物膜观察是通过SEM进行的。此外，还尝试使用ODS为0.5和1.5的细菌悬浮液使用菌群分析。由于SEM观察，所有五种细菌都遵循胶结的品质，确认了生物膜的形成。 Flora分析表明，动力学不同，具体取决于人工生物膜的成熟度和细菌密度。人们认为，在使用人工生物膜进行模拟时，需要进一步的考虑，例如细菌密度的条件。