重症熱中症の病態解明および血管内皮障害に対する新規治療法探索

阐明严重中暑的病理学并探索血管内皮疾病的新治疗方法

• 批准号: 21K09033
• 负责人: 平湯 恒久
• 金额: $ 2.25万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09033/
• 关键词: 熱中症; 細胞外小胞; 血管内皮傷害; 血小板由来蛋白; 播種性血管内凝固症候群; DIC; 血管内皮障害; 播種性血管内凝固症候群（DIC）; Extracellular Vesicles

前年度、健常マウスより採血し、血小板を活性化させて2回の超遠心法で、血小板由来蛋白及びサイズの異なる2つの血小板由来細胞外小胞と3つに分けることができた。今年度は熱中症モデルマウスの作成を行った。インキュベーター内に水を入れることで湿度80％以上の多湿環境を再現し、インキュベーターの温度設定を調整し高温多湿環境を作成した。マウスの腹腔内にボタン型温度データロガーを埋め込み、インキュベーターの温度を３７℃、41℃の高温多湿環境に1時間マウスを入れて実験を行ったところ３７℃では全例生存したが、４１℃では全例死亡した。ボタン型温度データロガーを取り出し解析すると、３７℃環境下ではインキュベーターに入れた後から徐々に腹腔内の温度が上昇し1時間後に４０℃近くまで上昇する一方で、４１℃の環境下ではインキュベーターに入れた２５-３０分後に腹腔内の温度がピークに達し、その後腹腔内温度は軽度低下しておりピークの時間付近で死亡したことが予測された。温度・時間をそれぞれ調整し最終的に４０℃の環境下に３０分おくことで腹腔内温度は４２-４３℃まで上昇し、死亡率は著明に低下した。細胞間接着障害による血管内皮傷害のマーカーとしてsoluble VE-Cadherinを測定したところ、３７℃環境下と比較し40℃の環境下では有意にsoluble VE-Cadherinは上昇した。今年度までに、モデルマウスの作成、血小板を活性化させて血小板由来蛋白、２種類の細胞外小胞の抽出を行うことができた。

去年，从健康小鼠身上采集血液，激活血小板，通过两次超速离心，将其分离成三种类型：血小板源性蛋白质和两种不同大小的血小板源性细胞外囊泡。今年，我们制作了一只中暑模型小鼠。通过给培养箱注满水，我们重新创造了一个湿度超过80%的潮湿环境，并通过调整培养箱的温度设置，我们创造了一个炎热潮湿的环境。将纽扣型温度数据记录仪植入小鼠腹腔内，培养箱温度设定为37℃，将小鼠置于41℃湿热环境中1小时。小鼠在 37°C 时存活，但在 41°C 时，所有小鼠均存活。当我们拿出按钮型温度数据记录仪进行分析时，我们发现在37℃的环境下，放入培养箱后腹腔内的温度逐渐上升，1次后升至近40℃。小时，而在41℃的环境下，放入培养箱后，腹内温度升至近40℃，放入笼内25-30分钟后腹内温度达到峰值。气温略有下降，因此预计患者将在高峰期附近死亡。通过调节温度和时间，最后将动物置于40℃环境中30分钟，腹腔内温度升至42-43℃，死亡率显着降低。当测量可溶性 VE-钙粘蛋白作为细胞间粘附受损导致的血管内皮损伤的标志物时，与 37°C 相比，40°C 时可溶性 VE-钙粘蛋白显着增加。截至今年，我们已经能够创建模型小鼠、激活血小板并提取血小板衍生蛋白和两种类型的细胞外囊泡。