腸内細菌による膵臓癌化学療法抵抗性の機序解明と革新的治療法開発

阐明肠道细菌引起的胰腺癌化疗耐药机制并开发创新疗法

基本信息

批准号：
21K08805
负责人：
春木孝一郎
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

難治性消化器癌における腫瘍内腸内細菌とオートファジーの関係に着目した。膵臓癌において腫瘍内の腸内細菌の多様性、構成が予後と関係すると報告され、膵臓癌の進行や治療抵抗性において腸内細菌が何らかの影響を与えている可能性が強く示唆される.一方で、オートファジーには細胞質内に侵入した病原性細菌を捕獲、分解する生体防御機構の役割もあることが報告されており、腫瘍内腸内細菌によりオートファジー活性が変化する可能性がある。まず膵臓癌切除検体を用いて、オートファジーのマーカーであるBeclin 1とLC3Bに関して免疫組織学的染色を行い、オートファジー活性を評価した。オートファジー活性は分布（Proportion score）、および強度（Intensity score）で評価した。生存解析ではBeclin 1、LC3B共に予後との有意な関係は示さなかったことから、オートファジー単独ではなく、オートファジーの誘導に関わる種々の因子との相互作用で癌微小環境において腫瘍の進展や抗癌剤耐性などに寄与している可能性が示唆された。また膵臓癌細胞株（PANC-1、MiaPaCa2）を用いて抗癌剤投与によるオートファジー活性の変化を確認した。塩酸ゲムシタビンを投与したPANC-1に対してマイクロアレイ解析を行い、オートファジー関連遺伝子や複数のライソゾーム酵素の遺伝子が発現上昇していることを同定した。さらに塩酸ゲムシタビン濃度依存的にオートファジー/ライソゾーム酵素が活性化することをLC3、SQSTM1/p62、酸性αグルコシダーゼ（GAA）のWestern blottingで確認した。GAA遺伝子の抑制により塩酸ゲムシタビンによる抗腫瘍効果が増強された。

我们重点研究难治性胃肠癌瘤内肠道细菌与自噬之间的关系。据报道，肿瘤内肠道细菌的多样性和组成与胰腺癌的预后有关，强烈提示肠道细菌可能对胰腺癌的进展和治疗耐药性有一定的影响。自噬还发挥着一种生物防御机制的作用，可以捕获并降解侵入细胞质的病原菌，并且自噬活性可能会被瘤内肠道细菌改变。首先，使用胰腺癌切除标本，对自噬标记物 Beclin 1 和 LC3B 进行免疫组织学染色，以评估自噬活性。通过分布（比例评分）和强度（强度评分）来评估自噬活性。生存分析表明，Beclin 1和LC3B均与预后没有显着关系，这表明自噬不是一个独立的机制，而是与自噬诱导相关的多种因素相互作用，从而影响肿瘤进展和癌症微环境中的抗癌药物。这可能会导致抵抗。我们还使用胰腺癌细胞系（PANC-1、MiaPaCa2）证实了抗癌药物给药导致的自噬活性的变化。对盐酸吉西他滨处理的PANC-1进行微阵列分析，发现自噬相关基因和多种溶酶体酶基因的表达增加。此外，LC3、SQSTM1/p62 和酸性 α-葡萄糖苷酶 (GAA) 的蛋白质印迹证实自噬/溶酶体酶以盐酸吉西他滨浓度依赖性方式被激活。 GAA基因的抑制增强了盐酸吉西他滨的抗肿瘤作用。

项目成果

期刊论文数量（23）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

The Sulfur Microbial Diet and Risk of Colorectal Cancer by Molecular Subtypes and Intratumoral Microbial Species in Adult Men.

DOI：
10.14309/ctg.0000000000000338
发表时间：
2021-08-01
期刊：
Clinical and translational gastroenterology
影响因子：
3.6
作者：
Sikavi DR;Nguyen LH;Haruki K;Ugai T;Ma W;Wang DD;Thompson KN;Yan Y;Branck T;Wilkinson JE;Akimoto N;Zhong R;Lau MC;Mima K;Kosumi K;Morikawa T;Rimm EB;Garrett WS;Izard J;Cao Y;Song M;Huttenhower C;Ogino S;Chan AT
通讯作者：
Chan AT

Inhibition of lysosomal acid β-glucosidase induces cell apoptosis via impairing mitochondrial clearance in pancreatic cancer.

在胰腺癌中，溶酶体酸性 β-葡萄糖苷酶的抑制通过损害线粒体清除来诱导细胞凋亡。

DOI：
10.1093/carcin/bgac060
发表时间：
2022
期刊：
Carcinogenesis.
影响因子：
0
作者：
Yanagaki M;Shirai Y;Shimada Y;Hamura R;Taniai T;Horiuchi T;Takada N;Haruki K;Furukawa K;Uwagawa T;Kobayashi H;Ikegami T.
通讯作者：
Ikegami T.

膵臓癌に対するセラミド代謝制御による抗腫瘍効果の分子生物学的機序の解明

阐明神经酰胺代谢控制抗胰腺癌抗肿瘤作用的分子生物学机制

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kurazumi Hiroshi;Suzuki Ryo;Nawata Ryosuke;Yokoyama Toshiki;Tsubone Sarii;Mikamo Akihito;Hamano Kimikazu;谷合智彦，白井祥睦，嶋田洋太，羽村凌雅，柳垣　充，古川賢英，春木孝一郎，河合裕成，恩田真二，坂本太郎，後町武志，宇和川　匡，島田　周，田中真二，池上　徹．
通讯作者：
谷合智彦，白井祥睦，嶋田洋太，羽村凌雅，柳垣　充，古川賢英，春木孝一郎，河合裕成，恩田真二，坂本太郎，後町武志，宇和川　匡，島田　周，田中真二，池上　徹．

The prognostic significance of GNRI, sarcopenia, osteopenia in elderly and non-elderly patients with hepatocellular carcinoma after hepatic resection

GNRI、肌少症、骨质减少对老年和非老年肝细胞癌肝切除术后患者的预后意义