非アルコール性脂肪肝疾患における肝マクロファージの役割の解析と、その臨床応用

肝巨噬细胞在非酒精性脂肪肝中的作用分析及临床应用

基本信息

批准号：
21K08730
负责人：
雨宮秀武
金额：
$ 2.66万
依托单位：
University of Yamanashi
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

【目的】肝細胞癌（HCC）発症と進展における、背景肝に発現するマクロファージ（Mφ）成熟因子であり炎症のマーカーであるM-CSFの関与と、M-CSF受容体抑制剤のHCC増殖・発癌抑制効果を検討した。【方法】I：M-CSF欠損（op/op）とlittermateマウス（LT）にジエチルニトロサミン（DEN）を投与し肝発癌率と肝内のM1-type Mφ/M2-type Mφ比および血管新生因子（VEGF）発現を検討した。II：手術標本でM-CSF・新生血管発現、M2Mφ分布と、手術後の生命予後を解析した。III：分離肝Mφと単球を、M-CSF存在下で共培養しVEGF産生、血管内皮細胞（VEC）増殖を検討した。IV：マウスHCC株MH134を同系マウスへ皮下移植モデルヒトHCC細胞株（Huh-7）のヌードマウス脾臓移植モデル、さらに炎症性肝発癌モデルであるDEN誘発肝癌モデルを作成し、M-CSF受容体拮抗剤GW2580の投与効果を検討した。【結果】I：op/opで発癌率がLTと比較し有意に低下。DEN投与後のop/opで腫瘍周囲のM1/M2 Mφ比,、血管新生がLTと比較し有意に減少した。II：M-CSF、新生血管発現の高発現群においてDFSが有意に短縮していた。M-CSF発現は独立した予後因子であった。III：肝Mφと単球は、M-CSF存在下でM-CSF濃度依存性にVEGFを産生し、肝Mφで有意に亢進していた。VECはM-CSFと肝Mφの共培養条件下で増殖が最も亢進していた。IV：マウスHCC株ならびにヒトHCC細胞株においてGW2580投与により腫瘍増殖が有意に抑制した。さらに、DEN肝発癌モデルにおいてもGW2580投与で有意に肝発癌を抑制した。【考察】M-CSFを分子標的とするHCC新規個別化治療の可能性を示唆する結果であった。

[目的] 背景肝脏中表达的巨噬细胞（Mφ）成熟因子和炎症标志物M-CSF在肝细胞癌（HCC）的发生和进展中的参与，以及M-CSF受体抑制剂对肝癌的影响研究了 HCC 增殖的抗癌作用。 [方法] I：对M-CSF缺陷（op/op）和同窝小鼠（LT）给予二乙基亚硝胺（DEN），观察肝癌发生率、肝内M1型Mφ/M2型Mφ比值、血管生成因子（检查VEGF)表达。 II：我们分析了手术标本中M-CSF/新生血管的表达、M2Mφ分布以及术后生命预后。 III：在M-CSF存在下共培养离体肝脏Mφ和单核细胞，以检查VEGF的产生和血管内皮细胞（VEC）增殖。 IV：小鼠HCC系MH134皮下移植到同基因小鼠中我们还创建了人HCC细胞系（Huh-7）的裸鼠脾移植模型和DEN诱导的肝癌模型，这是一种炎症性肝癌发生模型。研究了施用拮抗剂 GW2580 的效果。 [结果] I：与 LT 相比，op/op 的癌症发病率显着降低。与 LT 相比，DEN 给药后 Op/op 的 M1/M2 Mφ 比值和肿瘤周围的血管生成显着降低。 II：M-CSF和新生血管表达高的组中DFS显着缩短。 M-CSF表达是一个独立的预后因素。 III：在M-CSF存在的情况下，肝脏Mφ和单核细胞以M-CSF浓度依赖性方式产生VEGF，并且在肝脏Mφ中显着增强。在 M-CSF 和肝脏 Mφ 共培养条件下，VEC 增殖最为增强。 IV：在小鼠 HCC 系和人 HCC 细胞系中施用 GW2580 显着抑制肿瘤生长。此外，GW2580的施用显着抑制DEN肝癌发生模型中的肝癌发生。 [讨论] 这些结果表明使用 M-CSF 作为分子靶点的新的 HCC 个性化治疗的可能性。