iPS cell-derived macrophage therapy regulating tumor micro environment

iPS细胞源性巨噬细胞疗法调节肿瘤微环境

• 批准号: 21K08351
• 负责人: 福島 聡
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08351/
• 关键词: メラノーマ; マクロファージ; 免疫チェックポイント阻害薬; マウスモデル; iPS細胞; インターフェロン; 腫瘍微小環境; がん免疫療法; メラノーマ; マクロファージ; 免疫チェックポイント阻害薬; マウスモデル; iPS細胞; インターフェロン; 腫瘍微小環境; がん免疫療法

遺伝子改変iPS細胞由来マクロファージ（iPS-MP）によって腫瘍微小環境を抗腫瘍状態にし、免疫チェックポイント阻害薬無効なメラノーマを治療することが本研究の目的である。そのために、前年度までに、ルシフェラーぜを用いたin vivoイメージング技術を用いた腹膜播種モデルにおいて、抗PD-L1抗体がIsotype抗体に対してある程度有効ではあるが、完全には腫瘍を拒絶できない、まさに臨床の状況を模倣するマウスモデルを確立していた。今年度は、ここに遺伝子改変iPS-MPを併用し、マウスメラノーマを完全に治癒させることを目指し実験を行った。その結果、抗PD-L1抗体単剤でも、IFN-β遺伝子を導入したiPS-MP（iPS-MP-IFN-β）の単独投与でも治療効果が十分でない条件において、抗PD-L1抗体とIFN-β遺伝子を導入したiPS-MPの併用療法によって、有意に治療効果が増強するデータを得た。これについては、複数回実験を重ね、再現性を確認した。また、その同様の４群すなわち、抗PD-L1抗体単剤、iPS-MP-IFN-β単独、抗PD-L1抗体とiPS-MP-IFN-βの併用、コントロール群において、同様の腫瘍の播種と治療を行い、コントロール群マウスが死亡する直前の状態でマウスをsacrificeし、腫瘍を取り出して、浸潤リンパ球の解析を行った。解析方法はフローサイトや免疫染色を用いた。これについてはまだ、preliminaryな段階ではあるが、併用群においてTregが減少しているデータを得ている。セミアロジェニックな環境での治療実験については、上述の実験で用いたC57BL7マウスとMHC class-IIの一部だけが異なるiPS細胞（129）からiPS-MPを作成した。来年度はよりこの細胞を用いてより臨床に即したモデルでも検討を行なっていく。

这项研究的目的是将肿瘤微环境置于抗肿瘤状态，并具有转基因IPS细胞衍生的巨噬细胞（IPS-MP），并治疗与免疫检查点抑制剂无效的黑色素瘤。为此，在上一年中，我们建立了一种使用Lucifera的体内成像技术的腹膜传播模型中模仿临床情况的小鼠模型，尽管抗PD-L1抗体在某种程度上有效地针对同种型抗体有效，但无法完全拒绝肿瘤。今年，我们通过使用转基因IPS-MP进行了一项实验，以完全治愈小鼠黑色素瘤。结果，获得的数据是，与IFN-β基因一起引入的抗PD-L1抗体和IPS-MP的联合疗法显着增强，即即使使用IPS-MP（IPS-MP-IFN-β）单独给予治疗效果，即使治疗效果也不够，也是IFN-β基因引入的。重复多次以确认可重复性。此外，在这四个类似组中，单独使用抗PD-L1抗体，IPS-MP-IFN-β，抗PD-L1抗体和IPS-MP-IFN-β的组​​合使用，并用相似肿瘤处理对照组，并且在对照组中牺牲了小鼠，在对照组中牺牲了，肿瘤已被驱除，并分析了肿瘤的肿瘤。分析方法是使用流部和免疫染色进行的。尽管这仍处于初步阶段，但显示了组合组中TREG减少的数据。为了在半源环境中进行治疗实验，IPS-MP是由IPS细胞（129）产生的，与C57BL7小鼠不同，并且仅在上述实验中使用的一部分MHC II。明年，我们还将使用这些细胞研究一个更临床相关的模型。