遺伝子治療を用いた強力なリンパ管新生療法の開発

使用基因疗法开发强大的淋巴管生成疗法

基本信息

批准号：
21J10828
负责人：
加藤基
金额：
$ 0.96万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

リンパ管疾患に対する遺伝子治療を開発するにあたり、最適化したマウス尾部のリンパ浮腫モデルに対して遺伝子導入を行ったところ、局所における遺伝子発現は極めて低く、担体を用いた潰瘍部局所の遺伝子発現効率の向上が先立って必要と考えられた。すでに取り組み始めていた局在化の検討を推し進め、アデノ随伴ウイルス(AAV)を用いた遺伝子治療が根本的に抱える遠隔作用（off-target作用）の回避についても、高粘性のポリエチレングリコール（PEG）を担体として用いることで減弱できることが確認できた。またその機序として、熱の影響について細胞培養を用いた追加実験も行った。結果として、AAVは血清の存在下では熱の影響を受けづらい反面、血清の乏しい状況であるPEG内などでは遺伝子導入能が経時的に傷害されることが示唆された。つまり高粘性のPEG担体が潰瘍面における遺伝子導入の局在化を達成した要因として、PEG担体の粘性ゆえに潰瘍表面にAAVが適度に滞留したことが、局所での発現を低下させず、遠隔臓器である肝臓での作用を減弱するという結果につながったと考えられた。成果をCommunications Biology誌に投稿し、2023年4月19日に掲載が許可された。また、当大学工学部の協力を得て、体内投与されたPEGがどのような代謝を受けるのかについて、in vivoでの解析を行った。蛍光付与したＰＥＧにより代謝経路ごとの組織沈着量を評価することができ、分子量によって異なる動態であることが確認された。本研究結果は、ACS Macro Letters誌に投稿し、2023年4月3日に掲載された。（Ishikawa S, Kato M, et. al. ACS Macro Lett. 2023 Apr 18;12(4):510-517.）

在开发淋巴疾病的基因治疗时，我们将基因转移到优化的小鼠尾部淋巴水肿模型中，发现局部基因表达极低，因此首先考虑进行改善。我们正在推进定位研究（我们已经开始进行），并使用高粘度聚乙二醇（PEG）来避免脱靶效应，这是使用腺相关病毒（AAV）进行基因治疗的基础。经证实，将其用作载体可以减少衰减。我们还使用细胞培养物进行了额外的实验，以检查热作为一种机制的影响。结果表明，虽然 AAV 在血清存在下受热的影响较小，但在缺乏血清的条件下（例如 PEG），其基因转移能力会随着时间的推移而受损。换句话说，高粘度的PEG载体之所以能够实现基因转移在溃疡表面的定位，是因为PEG载体的粘度使AAV适度地保留在溃疡表面，而没有减少局部表达并转移到远处的器官这被认为导致其对肝脏的作用减弱。研究结果已提交给《通讯生物学》杂志，并于 2023 年 4 月 19 日接受发表。此外，我们与我校工学部合作，对PEG注入体内后的代谢情况进行了体内分析。使用荧光 PEG 可以评估每个代谢途径沉积的组织量，并且已证实动力学根据分子量而不同。该研究结果提交至《ACS Macro Letters》杂志并于 2023 年 4 月 3 日发表。（Ishikawa S、Kato M 等人。ACS Macro Lett。2023 年 4 月 18 日；12(4):510-517。）

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

名称 0次放出スライム材料

名称：零级释放粘液材料

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Molecular Weight-dependent Diffusion, Biodistribution, and Clearance Behavior of Tetra-armed Poly(ethylene glycol) Subcutaneously Injected into the Back of Mice.

皮下注射到小鼠背部的四臂聚乙二醇的分子量依赖性扩散、生物分布和清除行为。

DOI：
10.1021/acsmacrolett.3c00044
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Ishikawa S; Kato M; Si J; Yu L; Kimura K; Katashima T; Naito M; Kurita M; Sakai T.
通讯作者：
Sakai T.

Molecular Weight-dependent Diffusion, Biodistribution, and Clearance Behavior of Tetra-armed Poly(ethylene glycol) Subcutaneously Injected into the Back of Mice.

皮下注射到小鼠背部的四臂聚乙二醇的分子量依赖性扩散、生物分布和清除行为。

DOI：
10.1021/acsmacrolett.3c00044
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Ishikawa S; Kato M; Si J; Yu L; Kimura K; Katashima T; Naito M; Kurita M; Sakai T.
通讯作者：
Sakai T.

皮下投与された高分子化合物の分子量依存的な生体内分布解析-蛍光PEGを用いた評価-

皮下注射高分子化合物的分子量依赖性生物分布分析 - 使用荧光 PEG 进行评估 -