Elucidation of molecular pathogenesis of TTR amyloid neuropathy

阐明 TTR 淀粉样神经病的分子发病机制

基本信息

批准号：
21K07307
负责人：
村上龍文
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kawasaki University of Medical Welfare
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07307/
关键词：
アミロイドーシストランスサイレチン修復シュワン細胞ニューロパチー家族性アミロイドポリニューロパチー末梢神経再生 c-Jun ヒトTTR遺伝子ヒトトランスサイレチン遺伝子アミロイドニューロパチーシュワン細胞アポトーシスアミロイド

项目摘要

家族性アミロイドポリニューロパチー（FAP; ATTRv）では異型トランスサイレチン（TTR）が末梢神経に沈着し、神経障害を起こすがその病態機序は不明である。我々はこれまでシュワン細胞でTTR遺伝子を発現しているのを見出し、ヒト異型TTR遺伝子発現FAPモデルマウスのDRGから不死化シュワン培養細胞TgS1を確立し、シュワン細胞の神経障害への関与について研究をすすめてきた。本研究ではこのTgS1をシュワン細胞増殖培地(SCM)と通常の培養細胞培地(CM)で培養し、TTR遺伝子とシュワン細胞マーカー遺伝子の発現を定量RT-PCRで調べた。TgS1はCM培地では増殖が停止し、小さな紡錘状の形態を呈した。TTR遺伝子はCM培地で約1700倍と著明に増加し、分化マーカー遺伝子ではミエリン蛋白であるMpZは減少し、Sox10やNgfrは増加していた。次に修復シュワン細胞マーカー遺伝子の発現を定量したところ、c-Jun、Sox2、Gdnfでは増加していた。さらに免疫細胞染色とウエスタンブロット法で調べると、TTR蛋白はGolgiに局在し、細胞外に分泌されていた。さらにTgS1にc-Jun siRNAを導入するとc-Junは低下し、TTRは19%まで著明に減少した。逆にTTR siRNA導入するとTTRは減少したが、修復シュワン細胞の表現型は保たれていた。最後にHsf1遺伝子発現をsiRNAで低下させると細胞内にTTR凝集が認められた。TgS1はCMでreprogrammingされ修復細胞の表現型を呈し、c-Junを介してTTR遺伝子発現が著明に増加することが明らとなった。FAPではアミロイド圧迫による神経近位部の軸索障害で、遠位部のシュワン細胞が修復シュワン細胞へ変化し、TTR遺伝子発現が著明に増加し、末梢神経内膜へのTTR沈着を増強していることが示唆された。

在家族性淀粉样多发性神经病（FAP；ATTRv）中，非典型转甲状腺素蛋白（TTR）沉积在周围神经中并引起神经病变，但其病理机制尚不清楚。我们之前发现TTR基因在雪旺细胞中表达，并从表达人非典型TTR基因的FAP模型小鼠的DRG中建立了永生化雪旺培养细胞TgS1，并进行了雪旺细胞参与神经系统疾病的研究。本研究将该TgS1在雪旺细胞生长培养基（SCM）和正常细胞培养基（CM）中培养，并通过定量RT-PCR检测TTR基因和雪旺细胞标记基因的表达。 TgS1 在 CM 培养基中停止生长并呈现小纺锤状形态。 TTR基因在CM培养基中显着增加约1700倍，并且在分化标记基因中，髓鞘蛋白MpZ减少，Sox10和Ngfr增加。接下来，我们定量修复雪旺细胞标记基因的表达，发现c-Jun、Sox2和Gdnf增加。此外，免疫细胞化学染色和蛋白质印迹显示TTR蛋白定位于高尔基体并分泌到细胞外。此外，当c-Jun siRNA导入TgS1时，c-Jun减少，TTR显着降低至19%。相反，当引入TTR siRNA时，TTR降低，但修复的雪旺细胞表型得以维持。最后，当使用 siRNA 降低 Hsf1 基因表达时，在细胞内观察到 TTR 聚集。结果表明，TgS1在CM中被重新编程并表现出修复细胞表型，并且TTR基因表达通过c-Jun显着增加。在FAP中，淀粉样蛋白压迫导致神经近端部分的轴突损伤，导致远端部分的雪旺细胞发生变化以修复雪旺细胞，显着增加TTR基因表达，并增强周围神经神经内膜中的TTR沉积。建议

项目成果

期刊论文数量（9）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

TTR アミロイドニューロパチーの初期病変は後根神経節か:MRIでの検討

TTR 淀粉样神经病的初始病变是背根神经节吗：MRI 研究

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
村上龍文;渡部博之;山本　亮;砂田芳秀
通讯作者：
砂田芳秀

Mechanism of neurodegeneration in TTR E61K amyloid neuropathy: electron microscopic study

TTR E61K 淀粉样神经病的神经变性机制：电子显微镜研究

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Tatsufumi Murakami,Mineykuki Mizuguchi,Kazunori Sango;Shigenobu Tone;Kazuhiko Watabe;Yoshihide Sunada
通讯作者：
Yoshihide Sunada

ヒトトランスサイレチン遺伝子発現は修復シュワン細胞で著増し、神経障害を増強する

人转甲状腺素蛋白基因表达在修复的雪旺细胞中显着增加并加剧神经病变