Identification of the protease in blood that activates complement factor MASP-3

鉴定血液中激活补体因子 MASP-3 的蛋白酶

基本信息

批准号：
21K07083
负责人：
町田豪
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Fukushima Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

PAタグ融合リコンビナントマウスMASP-3（rmMASP-3-PA）を用いたクロスリンク共免疫沈降法で、MASP-3を活性化する酵素の候補として単離された分子について、遺伝子ノックアウトマウスの解析を行った。当該遺伝子欠損マウスの血清中におけるMASP-3ならびに補体D因子の活性化状態をWestern blottingで評価した結果、野生型マウス血清と同等であった。また、同マウス血清を用いて、補体第二経路、古典経路、レクチン経路の活性測定を行った結果、野生型―欠損マウス間で差は認められなかった。以上の結果から、本研究にてMASP-3を活性化する酵素の候補として単離された分子は、生体内におけるMASP-3の活性化ならびに補体活性化経路にほとんど関与しないことが強く示唆された。また、野生型rmMASP-3-PAならびにレクチン経路認識分子と複合体を形成しない変異型rmMASP-3-PAを用いて、認識分子との複合体形成がMASP-3の活性化に関与するかを調べた。その結果、野生型―変異型rmMASP-3-PA共にマウス尾静脈内投与後30分以内に活性化が起こり、生体内におけるMASP-3の活性化にレクチン経路認識分子との複合体形成は重要でないことが示された。一方、野生型rmMASP-3-PAはマウス尾静脈内投与後24時間においても検出されたのに対し、変異型は投与後12時間までにほぼ検出されなくなった結果から、MASP-3のレクチン経路認識分子との複合体形成は、MASP-3の血中における保持時間の延長に役割を果たしている可能性が強く示唆された。本成果について、前年度に行った国内、国際学会での口頭発表のデータを基に、査読付き英語論文での発表を行った。

分析了分离为酶的分子的遗传基因敲除小鼠，这些酶是使用PA TAG融合的小鼠MASP-3（RMMASP-3-PA）在交叉链接共同成像中激活MASP-3的酶。通过评估MASP-3的激活状态以及具有蛋白质印迹的基因缺陷小鼠血清中的补体D因子，它等同于野生小鼠血清。另外，由于使用小鼠血清测量第二路径，经典途径和凝集素途径的活性，因此野生缺陷小鼠之间没有差异。基于上述结果，强烈建议在这项研究中已分离为激活MASP-3的酶的分子很少参与MASP-3的振兴和生物中补偿的康复。完成了。此外，使用野生RMMASP-3-PA和不形成复合分子的突变体型RMMASP-3-PA，与识别分子的复合形成有关MASP-3的振兴它。结果，在小鼠尾静脉后30分钟内激活了两个野生rmMASP-3-PA，并重要的是形成具有凝集素路线识别机制的复合物以激活活体中的MASP-3。。另一方面，在小鼠尾静脉后24小时检测到野生型RMMASP-3-PA，而在给药后12小时几乎不再检测到突变体类型。可以在MASP-3的血液中延长维护时间来发挥作用。结果是根据上一年在国内和国际会议上口头介绍的数据在英语论文中与同行和审视的。

项目成果

期刊论文数量（9）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

MASP-3 の活性化におけるレクチン経路の認識分子の役割

凝集素途径识别分子在 MASP-3 激活中的作用

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
草刈浩平;石田由美;大森智子;鈴木俊幸;関亦正幸;町田豪;関根英治
通讯作者：
関根英治

The significance of complex formation of MASP-3 with pattern recognition molecules of the lectin complement pathway in the long-term retention of MASP-3 in the circulation

MASP-3 与凝集素补体途径的模式识别分子形成复合物对 MASP-3 在循环中长期保留的意义

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takeshi Machida;Kohei Kusakari;Yumi Ishida;Tomoko Omori;Toshiyuki Suzuki;Masayuki Sekimata;Teizo Fujita;and Hideharu Sekine
通讯作者：
and Hideharu Sekine

ヨウ素酸ナトリウム誘発網膜障害モデルマウスにおけるMASP-1の役割

MASP-1在碘酸钠诱导的小鼠视网膜损伤模型中的作用

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
大森智子;町田豪;石田由美;石龍鉄樹;関根英治
通讯作者：
関根英治

ARMS2 and CFH polymorphism and intraocular complement activation in neovascular age-related macular degeneration

ARMS2和CFH多态性与新生血管性年龄相关性黄斑变性的眼内补体激活

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
Ophthalmology Science
影响因子：
0
作者：
Yutaka Kato;Yasuharu Oguchi;Tomoko Omori;Akihito Kasai;Masashi Ogasawara;Yukinori Sugano;Kanako Itagaki;Akira Ojima;Yumi Ishida;Takeshi Machida;Hideharu Sekine;Tetsuju Sekiryu
通讯作者：
Tetsuju Sekiryu

補体の多面性：自然免疫・獲得免疫と補体

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