Development of new Na,K-ATPase inhibitor and the study of its reaction mechanism

新型Na,K-ATP酶抑制剂的研制及其反应机理研究

基本信息

批准号：
21K06611
负责人：
鈴木邦明
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

研究分担者は(+)-laurenidificin、(-)-aplysiallene、(±)-aplysiallene、ブロモジエン部分の幾何異性体である(-)-及び(±)-bromodiene isomerを合成し、研究代表者に提供した。研究代表者は、これらの物質のラット及びウサギの脳Na,K-ATPaseに対する作用を解析して、既知の阻害薬であるouabainやbufadienolides作用と比較した。これらの結果を論文にまとめて公表する予定である。研究分担者は、上記の物質の合成以外に、H,K-ATPase阻害作用のあるminimiflorinの化学合成を開始した。H,K-ATPase阻害作用のある物質は、同じタイプのATPaseであるNa,K-ATPase活性も抑制する可能性が高く、Na,K-ATPase活性の調節に使用できる可能性があるからである。研究代表者は、合成物質の細胞毒性を検討するために神経系の細胞であるNeuro-2a細胞と、腎臓系の細胞であるHEK293細胞の培養を開始し、細胞数の計測から細胞毒性を解析する系を準備した。また、MTTアッセイにより毒性を解析する準備を行った。研究代表者は、サブタイプの異なるNa,K-ATPaseに対する合成物質の作用を検討するために、培養したNeuro-2a細胞とHEK293細胞を回収して、遠心分離操作によりミクロソーム分画を得た。Na,K-ATPase活性はミクロソーム分画に回収された。また、Na,K-ATPaseに近いP型ATPaseであるCa-ATPase活性もミクロソーム分画に存在した。今後、ミクロソーム分画を用いて、合成物質の各ATPaseに対する作用を解析することが可能となった。

共同研究人员合成了(+)-laurenidificin、(-)-aplysiallene、(±)-aplysiallene以及(-)-和(±)-溴二烯异构体，它们是溴二烯部分的几何异构体，并将其提供给首席研究员做到了。主要研究人员分析了这些物质对大鼠和兔子脑部 Na,K-ATP 酶的影响，并将其与已知抑制剂哇巴因和蟾蜍二烯内酯的影响进行了比较。我们计划将这些结果汇编并发表在一篇论文中。除了合成上述物质外，研究人员还开始了具有H,K-ATPase抑制活性的Minimiflorin的化学合成。这是因为抑制 H,K-ATP 酶的物质也可能抑制 Na,K-ATP 酶活性，这是同一类型的 ATP 酶，并且可用于调节 Na,K-ATP 酶活性。主要研究人员开始培养Neuro-2a细胞（神经系统细胞）和HEK293细胞（肾细胞）来检查合成物质的细胞毒性，并通过计算我准备的系统的细胞数量来分析细胞毒性。做这个。此外，还准备使用MTT分析来分析毒性。为了研究合成物质对Na,K-ATP酶不同亚型的影响，主要研究者收集了培养的Neuro-2a细胞和HEK293细胞，并通过离心获得微粒体级分。 Na,K-ATP酶活性在微粒体部分中恢复。 Ca-ATP 酶活性是一种类似于 Na,K-ATP 酶的 P 型 ATP 酶，也存在于微粒体部分中。将来，将有可能利用微粒体分级分析合成物质对每种 ATP 酶的影响。

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Reversible inhibition of Ca2+- or Mg2+-dependent ATPase activity in the rat brain by local anesthetics

局麻药对大鼠脑内 Ca2 或 Mg2 依赖性 ATP 酶活性的可逆抑制

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
北海道歯学雑誌
影响因子：
0
作者：
Iwamoto Rie;Suzuki Kuniaki;Hase Yuri;Shibuya Makiko;Kimura Yukifumi;Fujisawa Toshiaki
通讯作者：
Fujisawa Toshiaki

口腔がん細胞のシスプラチン耐性化に伴う白金系抗がん剤及び強心配糖体に対する感受性の変化

口腔癌细胞对顺铂耐药导致铂类抗癌药物和强心苷敏感性发生变化

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
北海道歯学雑誌
影响因子：
0
作者：
石村菜穂子;江田諒太郎;鈴木仁人;小島史章;北里英郎;前花祥太郎.;義達　理恵子，鈴木　邦明，吉村　善隆，南川　元，鄭　漢忠
通讯作者：
義達　理恵子，鈴木　邦明，吉村　善隆，南川　元，鄭　漢忠

Mg，Ca及びZnのヒトアルカリ性ホスファターゼ活性に対する作用

镁、钙、锌对人体碱性磷酸酶活性的影响

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
北海道歯学雑誌
影响因子：
0
作者：
Toba Hiroe;Ikemoto Mitsushi J.;Kobara Miyuki;Nakata Tetsuo;半谷　純一，鈴木　邦明，吉村　善隆，南川　元，兼平　孝，本多　丘人
通讯作者：
半谷　純一，鈴木　邦明，吉村　善隆，南川　元，兼平　孝，本多　丘人