糖鎖間相互作用のハイスループットなメカニズム解析に向けた可視サイズシステムの構築

构建用于糖链相互作用高通量机械分析的可见尺寸系统

基本信息

批准号：
21K05298
负责人：
長谷川輝明
金额：
$ 2万
依托单位：
Toyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

バクテリアセルロースから構成されたヒドロゲルであるナタデココに対する化学修飾を行い、LeX糖鎖やGM3糖鎖、さらにはGg3糖鎖を導入したナタデココ（それぞれNDC-LeX、NDC-GM3、およびNDC-Gg3と略）を合成した。元素分析によるN/C値や、化学構造選択的な各種染色剤を用いた染色試験により、これらの糖鎖を導入したナタデココが合成できていることを確認した。また、特定の糖鎖を認識するレクチンを用いるとこれらの糖修飾NDCが水中で会合することでも、これらの糖鎖がナタデココに導入できていることを確認した。水溶液中でNDC-LeX同士の会合試験を行い、Ca2+またはNa+の共存でNDC-LeX同士が会合することを確認した。また参照物質としてLeX糖鎖からFuc残基を削除した部分構造であるLacNAcを導入したNDC-LacNAc、Fuc残基に加えてGal残基も削除した部分構造であるGlcNAcを導入したNDC-GlcNAcなども合成し、これらの会合試験も行った。これらの参照実験により、LeX同士の会合にはFuc残基とGal残基の両者が必須であることを確認した。また、NDC-GM3とNDC-Gg3との間のヘテロな糖鎖間相互作用についても評価を行った。NDC-GM3とNDC-Gg3との間の相互作用はCa2+によって誘導されることを確認した。これに関する参照実験としては、GM3の部分構造であるLacおよびGlcを導入したNDC-LacおよびNDC-Glcを用いて、これらの糖修飾ナタデココとGg3との間の相互作用を評価し、GM3糖鎖の末端シアル酸や中間Gal残基がGg3との相互作用に重要であることを確認した。また、NDC-Gg3の代わりにNDC-LacまたはNDC-Galを用いた参照実験でも、Gg3糖鎖のGalNAcや中間Gal残基がGg3との相互作用に重要であることを確認した。

NATA de Coco是一种由细菌纤维素制成的水凝胶，已化学修饰以合成与LEX，GM3和GG3糖链合成NATA de Coco（缩写为NDC-LEX，NDC-GM3和NDCGG3）。通过使用元素分析和化学结构选择性染料的各种染料进行染色测试，可以确认与这些糖链一起引入的Nata de Coco已合成。此外，当使用识别特定糖链的凝集素时，这些糖改性的NDC在水中助理，并确认可以将这些糖链引入Nata de Coco中。在NDC-LEX之间进行了关联测试，并通过共存Ca2+或Na+证实了关联。 Additionally, NDC-LacNAc, which introduced LacNAc, a partial structure in which the Fuc residue is removed from the LeX sugar chain, was also synthesized as a reference substance, and NDC-GlcNAc, which introduced GlcNAc, a partial structure in which the Fuc residue is removed from the Gal residue in addition to the Fuc residue, were also synthesized, and these association tests were also carried out.这些参考实验证实，FUC和GAL残基对于Lex之间的关联至关重要。此外，评估了NDC-GM3和NDC-GG3之间的异糖基化相互作用。我们确认NDC-GM3和NDC-GGG3之间的相互作用是由Ca2+诱导的。作为参考实验，我们使用了引入GM3的部分结构的NDC-LAC和NDC-GLC来评估这些糖改性的Natadecoco和GG3之间的相互作用，并确认末端唾液酸和中间糖的糖糖的中间糖残基对其与GG3的相互作用很重要。此外，使用NDC-LAC或NDC-GAL而不是NDC-GG3的参考实验证实，GG3糖链中的GalNAC和中间gal残基对于与GG3的相互作用很重要。