オンライン還元反応を用いた測定対象物の構造に依存しない蛍光誘導体化LC定量法

利用在线还原反应，不依赖于分析物结构的荧光衍生LC定量方法

基本信息

批准号：
21K05135
负责人：
能田均
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Fukuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

蛍光検出法は、LC分析における検出法の一つであり、LC-質量分析（MS）が主流となった現在においても、その検出感度、汎用性、安定性、費用対効果から利用することも多い。その際、測定対象の多くは蛍光性を持たないため、蛍光団を測定対象物へ化学修飾する蛍光誘導体化法が用いられる。蛍光誘導体化法を用いることで、無蛍光性の測定対象物であっても、構造中に反応活性部位があれば、蛍光検出が可能となる。そのため現在では数多くの蛍光誘導体化試薬が開発され、市販されており、広範囲の分野において、多くの物質に対して適用可能となっている。しかし、測定対象物の構造内に重原子や強力な電子求引基もしくは、別の吸光団を持つ化合物は、重原子効果または蛍光共鳴エネルギー移動などにより減光または消光する場合がある。このような場合、高感度な分析が困難であった。またこれらの官能基が存在しない場合でも、測定対象物の化学構造が蛍光強度に影響を与えるため、同じ蛍光団を誘導体化した場合でも、測定対象物によってそれぞれ異なる蛍光強度が異なる。そのため、通常のLC分析と同様に、測定対象物それぞれ個別の標準品が必要となる。これらの問題点は、蛍光発現が種々の環境に影響されることに起因するものであり、現状の蛍光誘導体化LC分析法では解決することは難しい。今回提案する蛍光誘導体化-LC法は、ジスルフィド結合を有する蛍光誘導体化試薬を、測定対象物へ誘導体化し、LC分離後、オンライン還元反応を行うことで、検出する蛍光物質を共通の蛍光物質として蛍光検出を規格化するものである。これにより、測定対象物の構造に依存しない検出が可能となり、これまで蛍光誘導体化が適用できなかった物質（重原子または強力な電子求引基を含有する物質）への適用や、個別の標準品を必要としない定量が可能となる。

荧光检测是LC分析的检测方法之一，即使在今天，LC质量光谱法（MS）已成为主流，通常用于检测灵敏度，多功能性，稳定性和成本效益。在这种情况下，由于大多数测量对象没有荧光性能，因此使用荧光衍生化方法将荧光团化学化为要测量的对象。通过使用荧光衍生化方法，即使对象是非荧光的，如果结构中有反应活性位点，也可以实现荧光检测。因此，许多荧光衍生化试剂已经开发和市售，并且适用于许多范围内的许多物质。但是，由于沉重的原子效应或荧光共振能传递，在要测量的物体结构内具有沉重原子，强烈撤回基团或其他吸收器基团的化合物可能会变暗或淬火。在这种情况下，很难进行高度敏感的分析。此外，即使不存在这些官能团，要测量的物体的化学结构也会影响荧光强度，因此，即使衍生出相同的荧光团，荧光强度也会取决于要测量的物体。因此，与普通LC分析一样，要测量每个对象都需要单个标准产品。这些问题来自各种环境的荧光表达的影响，并且很难通过当前的荧光衍生化LC分析方法解决。此处提出的荧光衍生化LC方法是将荧光衍生化试剂衍生成具有二硫键的荧光衍生化试剂，并在LC分离后，将要检测到的荧光物质作为常见的荧光物质进行，并通过在线减少反应进行归一化荧光检测。这种实现的检测不取决于测量物体的结构，从而可以将其应用于以前无法应用于荧光衍生化的物质（包含重原子或较重的电子撤回组的物质），以及无需单个标准产品而定量确定的物质。

项目成果

期刊论文数量（44）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

三次元キラルHPLCを用いるリジンおよび代謝物の生体内含量解析

使用三维手性 HPLC 分析赖氨酸及其代谢物的体内含量

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
宮里ちひろ;中武樹;川末慎葉;古賀鈴依子;秋田健行;浜瀬健司;吉田秀幸;能田均;古賀鈴依子;古賀鈴依子，荒牧雄也，三田真史，井手友美，坂口洋平，吉田秀幸，能田均，濱瀬健司
通讯作者：
古賀鈴依子，荒牧雄也，三田真史，井手友美，坂口洋平，吉田秀幸，能田均，濱瀬健司

酸加水分解-誘導体化-LC-MS法によるタンパク質のアシル化度評価法

采用酸水解-衍生化-LC-MS法评价蛋白质酰化度的方法

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
新井杏奈;守田羽吟;川末慎葉,;古賀鈴依子;三田真史;浜瀬健司;吉田秀幸;能田均;江頭順子，川末慎葉，坂口洋平，古賀鈴依子，吉田秀幸，能田均;重松孝尚，川末慎葉，坂口洋平，古賀鈴依子，吉田秀幸，能田均;守田羽吟，川末慎葉，古賀鈴依子，坂口洋平，三田真史，浜瀬健司，吉田秀幸，能田均;川末慎葉，坂口洋平，古賀鈴依子，吉田秀幸，能田均
通讯作者：
川末慎葉，坂口洋平，古賀鈴依子，吉田秀幸，能田均

Sensing of Acetylcholine-Related Compounds Using Cation-Selective Electrodes

使用阳离子选择性电极感测乙酰胆碱相关化合物

DOI：
10.2116/bunsekikagaku.70.261
发表时间：
2021
期刊：
BUNSEKI KAGAKU
影响因子：
0.2
作者：
TODOROKI Kenichiro;YOSHIZATO Kaori;YOSHIDA Hideyuki;YAMAGUCHI Masatoshi;NOHTA Hitoshi
通讯作者：
NOHTA Hitoshi

アミノ基を対象とした選択的誘導体化・抽出を可能とする新規LC-MS用誘導体化試薬の開発

开发新型 LC-MS 衍生试剂，可选择性衍生和提取氨基