オンライン還元反応を用いた測定対象物の構造に依存しない蛍光誘導体化LC定量法

利用在线还原反应，不依赖于分析物结构的荧光衍生LC定量方法

基本信息

批准号：
21K05135
负责人：
能田均
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Fukuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

蛍光検出法は、LC分析における検出法の一つであり、LC-質量分析（MS）が主流となった現在においても、その検出感度、汎用性、安定性、費用対効果から利用することも多い。その際、測定対象の多くは蛍光性を持たないため、蛍光団を測定対象物へ化学修飾する蛍光誘導体化法が用いられる。蛍光誘導体化法を用いることで、無蛍光性の測定対象物であっても、構造中に反応活性部位があれば、蛍光検出が可能となる。そのため現在では数多くの蛍光誘導体化試薬が開発され、市販されており、広範囲の分野において、多くの物質に対して適用可能となっている。しかし、測定対象物の構造内に重原子や強力な電子求引基もしくは、別の吸光団を持つ化合物は、重原子効果または蛍光共鳴エネルギー移動などにより減光または消光する場合がある。このような場合、高感度な分析が困難であった。またこれらの官能基が存在しない場合でも、測定対象物の化学構造が蛍光強度に影響を与えるため、同じ蛍光団を誘導体化した場合でも、測定対象物によってそれぞれ異なる蛍光強度が異なる。そのため、通常のLC分析と同様に、測定対象物それぞれ個別の標準品が必要となる。これらの問題点は、蛍光発現が種々の環境に影響されることに起因するものであり、現状の蛍光誘導体化LC分析法では解決することは難しい。今回提案する蛍光誘導体化-LC法は、ジスルフィド結合を有する蛍光誘導体化試薬を、測定対象物へ誘導体化し、LC分離後、オンライン還元反応を行うことで、検出する蛍光物質を共通の蛍光物質として蛍光検出を規格化するものである。これにより、測定対象物の構造に依存しない検出が可能となり、これまで蛍光誘導体化が適用できなかった物質（重原子または強力な電子求引基を含有する物質）への適用や、個別の標準品を必要としない定量が可能となる。

荧光检测是LC分析中的检测方法之一，即使现在LC-质谱（MS）已成为主流，由于其检测灵敏度、多功能性、稳定性和成本效益，它仍然被使用。在这种情况下，由于大多数测量目标不具有荧光，因此使用其中用荧光团对测量目标进行化学修饰的荧光衍生方法。通过使用荧光衍生化方法，即使是非荧光测量目标，如果其结构中具有反应位点，也可以通过荧光检测。因此，现在许多荧光衍生化试剂已经被开发出来并商业化，可以应用于广泛领域的许多物质。然而，测量目标结构中含有重原子、强吸电子基团或其他吸收基团的化合物可能会由于重原子效应或荧光共振能量转移而衰减或猝灭光。在这种情况下，高度敏感的分析就很困难。另外，即使不存在这些官能团，测定对象物的化学结构也会影响荧光强度，因此即使将同一荧光团衍生化，荧光强度也会根据测定对象物而变化。因此，与正常的 LC 分析一样，每个待测量的物体都需要单独的标准。这些问题是由于荧光表达受各种环境影响所致，目前的荧光衍生化LC分析方法难以解决。此次提出的荧光衍生化-LC方法，将带有二硫键的荧光衍生化试剂与分析物进行衍生化，LC分离后进行在线还原反应，将待检测的荧光物质转化为普通的荧光物质，从而使荧光检测标准化。这使得检测不依赖于测量目标的结构，并且可以应用于荧光衍生化不适用的物质（含有重原子或强吸电子基团的物质），以及不适用的个别标准品的定量。需要一个产品是可能的。

项目成果

期刊论文数量（44）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

三次元キラルHPLCを用いるリジンおよび代謝物の生体内含量解析

使用三维手性 HPLC 分析赖氨酸及其代谢物的体内含量

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
宮里ちひろ;中武樹;川末慎葉;古賀鈴依子;秋田健行;浜瀬健司;吉田秀幸;能田均;古賀鈴依子;古賀鈴依子，荒牧雄也，三田真史，井手友美，坂口洋平，吉田秀幸，能田均，濱瀬健司
通讯作者：
古賀鈴依子，荒牧雄也，三田真史，井手友美，坂口洋平，吉田秀幸，能田均，濱瀬健司

酸加水分解-誘導体化-LC-MS法によるタンパク質のアシル化度評価法

采用酸水解-衍生化-LC-MS法评价蛋白质酰化度的方法

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
新井杏奈;守田羽吟;川末慎葉,;古賀鈴依子;三田真史;浜瀬健司;吉田秀幸;能田均;江頭順子，川末慎葉，坂口洋平，古賀鈴依子，吉田秀幸，能田均;重松孝尚，川末慎葉，坂口洋平，古賀鈴依子，吉田秀幸，能田均;守田羽吟，川末慎葉，古賀鈴依子，坂口洋平，三田真史，浜瀬健司，吉田秀幸，能田均;川末慎葉，坂口洋平，古賀鈴依子，吉田秀幸，能田均
通讯作者：
川末慎葉，坂口洋平，古賀鈴依子，吉田秀幸，能田均

Sensing of Acetylcholine-Related Compounds Using Cation-Selective Electrodes

使用阳离子选择性电极感测乙酰胆碱相关化合物

DOI：
10.2116/bunsekikagaku.70.261
发表时间：
2021
期刊：
BUNSEKI KAGAKU
影响因子：
0.2
作者：
TODOROKI Kenichiro;YOSHIZATO Kaori;YOSHIDA Hideyuki;YAMAGUCHI Masatoshi;NOHTA Hitoshi
通讯作者：
NOHTA Hitoshi

アミノ基を対象とした選択的誘導体化・抽出を可能とする新規LC-MS用誘導体化試薬の開発

开发新型 LC-MS 衍生试剂，可选择性衍生和提取氨基