リンパ節由来ストローマ細胞株を用いる人工リンパ節構築系の開発

使用淋巴结来源的基质细胞系开发人工淋巴结构建系统

• 批准号: 21K04791
• 负责人: 曲 正樹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K04791/
• 关键词: ストローマ細胞; リンパ節; B細胞; T細胞; 胚中心; 抗体産生細胞; 濾胞樹状細胞

リンパ節は，体内に侵入した病原体 (抗原) に対する免疫応答を活性化するために重要な二次リンパ組織である．リンパ球は，血管とリンパ管を通して全身のリンパ組織を循環しているが，病原体が侵入した際には感染部位近傍のリンパ節で活性化し，ストローマ細胞の制御のもと抗原への免疫応答を開始する．本課題では，体内に抗原が侵入した際のリンパ節での動的変化を解析するため，リンパ組織の支持細胞であるストローマ細胞を利用し，生体内に免疫能力を備えたリンパ節構造を構築できるシステムを開発することを目的とした．そのために，申請者が樹立したストローマ細胞株（FL-Y細胞）を利用した．本年度は，FL-Y細胞のB細胞支持能に関わる因子を探索するため，前年度に解析済みのFL-Yの活性化に伴い発現上昇する遺伝子の免疫系細胞に与える作用を評価した．まず，FL-Y細胞が活性化に伴い発現するSlam-family member 8（SLAMF8）を恒常的に発現させるため，SLAMF8発現ベクターを遺伝子導入し，SLAMF8高発現FL-Y細胞を樹立した．その後，FL-Y細胞とSLAMF8高発現FL-Y細胞のリンパ球に与える作用を比較した結果，SLAMF8の高発現によるB細胞およびT細胞の活性化能力に違いは認められなかった．一方，SLAMF8の高発現により，FL-Y細胞が分化誘導し，B細胞の活性化を促進する単球系細胞の分化が促進されていた．これらの結果は，FL-Y細胞の発現するSLAMF8が間接的にB細胞を活性化する可能性を示唆する．

淋巴结是次要淋巴组织，对于激活针对侵入人体的病原体（抗原）的免疫反应非常重要。淋巴细胞通过血管和淋巴管在全身淋巴组织中循环，但当病原体入侵时，它们会在感染部位附近的淋巴结中被激活，并在基质细胞的控制下启动针对抗原的免疫反应。在这个项目中，为了分析抗原侵入体内时淋巴结的动态变化，我们将利用基质细胞（淋巴组织的支持细胞）来构建体内具有免疫能力的淋巴结结构。一个可以的系统。为此，我们使用了申请人建立的基质细胞系（FL-Y细胞）。今年，为了探索与FL-Y细胞支持B细胞的能力相关的因素，我们评估了前一年分析过的随着FL-Y激活而表达增加的基因对免疫系统细胞的影响。首先，为了持续表达FL-Y细胞激活后表达的Slam家族成员8（SLAMF8），我们引入了SLAMF8表达载体并建立了高表达SLAMF8的FL-Y细胞。随后，我们比较了FL-Y细胞和SLAMF8高表达的FL-Y细胞对淋巴细胞的影响，发现SLAMF8高表达导致激活B细胞和T细胞的能力没有差异。另一方面，SLAMF8的高表达诱导FL-Y细胞的分化，并促进促进B细胞活化的单核细胞的分化。这些结果表明FL-Y细胞表达的SLAMF8可能间接激活B细胞。

项目成果

単球系細胞が発現するUrokinase-type plasminogen activatorによるB細胞活性化機構の解明

单核细胞表达的尿激酶型纤溶酶原激活剂对 B 细胞激活机制的阐明

• 发表时间: 2022
• 作者: 羽里知美;高田美帆;西岡美玖;波多野直哉;金山直樹;徳光浩;曲正樹
• 通讯作者: 曲正樹

濾胞樹状細胞の発現するSLAM-family memberによる抗体応答の制御

滤泡树突状细胞中表达的 SLAM 家族成员对抗体反应的调节

• 发表时间: 2021
• 作者: 森田 俊哉;吉本 則子;西岡美玖，西岡美穂，小川紗也香，金山直樹，波多野直哉，徳光浩，曲正樹
• 通讯作者: 西岡美玖，西岡美穂，小川紗也香，金山直樹，波多野直哉，徳光浩，曲正樹

B細胞活性化能力を有する単球系細胞の分化におけるIL-34の糖鎖修飾による制御

糖基化对IL-34在具有B细胞活化能力的单核细胞分化中的调控

• 发表时间: 2022
• 作者: 曲正樹;岡本千怜;小川紗也香;金山直樹;波多野直哉;徳光浩
• 通讯作者: 徳光浩

Substrate recognition by Arg/Pro‐rich insert domain in calcium/calmodulin‐dependent protein kinase kinase for target protein kinases

• DOI: 10.1111/febs.16467
• 发表时间: 2022-05
• 期刊: The FEBS Journal
• 作者: Riku Kaneshige;Satomi Ohtsuka;Yuhei Harada;Issei Kawamata;M. Magari;N. Kanayama;N. Hatano;H. Sakagami;H. Tokumitsu

Conformation-Dependent Reversible Interaction of Ca2+/Calmodulin-Dependent Protein Kinase Kinase with an Inhibitor, TIM-063

Ca2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶与抑制剂 TIM-063 的构象依赖性可逆相互作用

• DOI: 10.1021/acs.biochem.1c00796
• 发表时间: 2022
• 期刊: Biochemistry
• 影响因子: 2.9
• 作者: Araya Kibrom Desta;Shuji Ohira;Ismail Arai;Kazutoshi Fujikawa;Satomi Ohtsuka;Taisei Okumura;Yuna Τabuchi;Tomoyuki Miyagawa;Naoki Kanayama;Masaki Magari;Naoya Hatano;Hiroyuki Sakagami;Futoshi Suizu;Teruhiko Ishikawa;Hiroshi Tokumitsu
• 通讯作者: Satomi Ohtsuka;Taisei Okumura;Yuna Τabuchi;Tomoyuki Miyagawa;Naoki Kanayama;Masaki Magari;Naoya Hatano;Hiroyuki Sakagami;Futoshi Suizu;Teruhiko Ishikawa;Hiroshi Tokumitsu