アンジオクラインファクターによる間葉上皮転換機構の解明と応用

血管分泌因子对间充质-上皮转化机制的阐明及应用

基本信息

批准号：
21J14797
负责人：
犬飼公一
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J14797/
关键词：
Apelin-APJ系転移 Apelin-APJと癌転移能

项目摘要

数種類の癌細胞系においてApelin過剰発現細胞でコントロールと比べて転移が増加し、APJノックアウト細胞においては転移が減少するという結果がマウスの尾静注転移モデルにおいて確認された。また興味深いことにAPJノックアウト癌細胞はIn vitroにおいては増殖能が抑制され、浸潤能だけが亢進することが各癌細胞にて示された。このことは、Apelin-APJシステムが転移におけるEMTと関連していることを示唆するものであった。その中で最終年度、B16マウス悪性黒色腫の皮下移植モデルを解析したところ、APJノックアウトB16腫瘍とコントロールのB16腫瘍で、腫瘍体積に有意な差はなかったが、APJノックアウト腫瘍では血管密度が低下しているにも関わらず腫瘍のサイズが保たれることが明らかとなった。つまり、腫瘍血管新生以外の血流機構によって腫瘍成長を維持している可能性が高いと推定されたため、メラノーマなどに特有の病理学的現象である「血管模倣」に着目し、APJがこの血管模倣の生成に関与していることを実験的に証明した。次に、これらの形態変化は癌細胞のEMTによって誘導されているのではないかという仮説を検証した。結果、TGF-βの内在的な発現をリアルタイムPCRで確認すると、間葉系の形態を示すAPJノックアウト細胞で有意に上昇していた。また、代表的な間葉系のマーカーである転写因子Zeb1の顕著な上昇をAPJノックアウト細胞で認めた。このZeb1はアペリン過剰発現細胞においては著明に抑制されており、アペリンAPJ系とEMTを促進する転写因子であるZeb1の強い関連が示された。TGF-β受容体阻害剤を用いた上流のシグナル解析では、APJのシグナルはTGF-β/Smadシグナルとは独立したEMTシグナル伝達機構を有する可能性が示唆された。

在几种类型的癌细胞系统中，与对APELIN OVERREA细胞的控制相比，转移增加了，并且在小鼠Otoshi Note模型中证实了APJ基因敲除细胞的转移。有趣的是，每个癌细胞都表明APJ基因敲除癌细胞在体外受到抑制，并且只有浸润才能增强。这表明Apelin-APJ系统与转移中的EMT有关。在去年，分析了B16小鼠恶性黑肿胀的皮下移植模型，分析了APJ敲除B16肿瘤和对照B16肿瘤的肿瘤体积没有显着差异，但血管密度降低了APJ敲除肿瘤。尽管事实是，很明显肿瘤的大小得到了维持。换句话说，假定肿瘤的生长是由新的肿瘤血管以外的血液机制高度维持的，因此APJ专注于黑色素瘤特殊的“血管模仿”。接下来，我们检查了以下假设：这些形式的变化是由癌细胞的EMT指导的。结果，当在实时PCR中确认TGF-β的内部表达时，表明介子系统形式的APJ基因敲除细胞显着增加。 APJ基因敲除细胞已经认识到转录因子Zeb1的显着上升，这是一种代表性的枫木标记。该ZEB1在开丁蛋白的电流细胞中已得到了显着抑制，并且在开瓶器APJ与促进EMT的转录因子之间显示出很强的关联。使用TGF-β受体抑制剂的上游信号分析表明，APJ信号可能具有与TGF-β/SMAD信号无关的EMT信号传递机制。